膠體金離子標(biāo)記小鼠抗*單克隆抗體IgG

抗原修復(fù)——原因 
*常規(guī)的石蠟切片標(biāo)本均用甲醛固定，結(jié)果使得： 
-抗原性物質(zhì)形成醛鍵、羧甲鍵而被封閉了部分抗原決定簇； 
-蛋白之間發(fā)生交聯(lián)而使抗原決定簇隱蔽。 
*要求：在染色時(shí)，需要*行抗原修復(fù)或暴露，即將固定時(shí)分子之間所形成的交聯(lián)破壞，而恢復(fù)抗原的原有空間形態(tài)。 

抗原修復(fù)——方法 
*化學(xué)方法 
*加熱方法 
-水浴加熱法 
-微波照射法 
-高壓加熱法 
-酸水解法 

化學(xué)方法 
*主要是通過(guò)一些酶的作用，使抗原決定簇暴露。常用的酶有：*、*等。 
C，10～40min，主要用于細(xì)胞內(nèi)抗原的顯示；°-*：一般使用濃度為0.05％～0.1％，消化時(shí)間為37 
C、30～180min，主要用于細(xì)胞間質(zhì)抗原的顯示。°-*：一般使用濃度為0.1%～0.4％，消化時(shí)間為37 
*例如：Laminin、CollagenIV 

化學(xué)方法 
*主要是通過(guò)一些酶的作用，使抗原決定簇暴露。常用的酶有：*、*等。 
C，10～40min，主要用于細(xì)胞內(nèi)抗原的顯示；°-*：一般使用濃度為0.05％～0.1％，消化時(shí)間為37 
C、30～180min，主要用于細(xì)胞間質(zhì)抗原的顯示。°-*：一般使用濃度為0.1%～0.4％，消化時(shí)間為37 
*例如：Laminin、CollagenIV 

水浴加熱法 
*將玻片放入裝有抗原修復(fù)液的容器中，加熱至沸騰，持續(xù)10～15分鐘。 
-優(yōu)點(diǎn)：操作簡(jiǎn)單、經(jīng)濟(jì)，適用于所有的實(shí)驗(yàn)室， 
-缺點(diǎn)：對(duì)封閉牢固的抗原決定簇暴露不理想。 

微波照射法 
*將玻片放入裝有抗原修復(fù)液的容器中，置微波爐加熱至95℃以上，持續(xù)l0～15分鐘，冷卻后，按免疫組化染色步驟進(jìn)行。 
*此方法由于微波場(chǎng)內(nèi)極性分子、離子高速運(yùn)動(dòng)，撞擊交聯(lián)的網(wǎng)鏈，使抗原異常的構(gòu)想恢復(fù)正常，且因分子運(yùn)動(dòng)產(chǎn)熱、效率高、時(shí)間短，對(duì)抗原再現(xiàn)效果好。 

高壓加熱法暴露抗原 
*將玻片浸入抗原修復(fù)液內(nèi)，置高壓鍋中高壓2～3min，可取得*的效果。 
*由于高壓下受熱均勻，特別使用于大批量標(biāo)本的染色。