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細胞核轉錄因子X盒結合蛋白抗體相關信息

時間:2013-2-26閱讀:638
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細胞核轉錄因子X盒結合蛋白抗體相關信息

 

抗體 (antibody, Ab) 
1
、抗體的概念: 
*
機體受到抗原刺激后,由漿細胞合成并分泌出一類具有與抗原發生特異性結合的球蛋白,被稱為抗體。 
-
抗體主要存在于血清內; 
-
抗體都是免疫球蛋白,但免疫球蛋白并不一定都是抗體。 
-
免疫球蛋白根據重鏈的結構及抗原特異性不同分為五種,既IgG、 IgDIgE IgAIgM。 

2
、免疫組化實驗中常用的抗體:單克隆抗體和多克隆抗體。 
*
單克隆抗體:是一個B淋巴細胞克隆分泌的抗體,是應用細胞融合雜交瘤技術免疫動物制備的。 
-
特異性強、抗體產量高。 
*
多克隆抗體:是將純化后的抗原直接免疫動物后,從動物血中所獲得的免疫血清,是多個B淋巴細胞克隆所產生的抗體混合物。 
-
特異性低,會產生抗體的交叉反應。 
-
多克隆抗體廣泛應用于石蠟包埋組織切片,可減少假陰性染色機會。 
-
抗原與抗體的結合,要求量保持一定比例,當抗原或抗體過量時,是不能聚合成大顆粒。 
3
、抗體的制備——多克隆抗體的制備 
*
動物的選擇 
*
佐劑(adjuvant) 
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免疫方法 
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免疫劑量 
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抗體效價的測定 
*
放血或定期抽血 
(1)
動物的選擇  細胞核轉錄因子X盒結合蛋白抗體相關信息 
選擇什么動物來免疫取決于: 
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所需抗血清的量 
-
小鼠只能提供1.01.5ml的血液,而山羊能提供幾升。 
*
能供免疫用的抗原量 
g
足夠,而山羊需要幾毫克。m-小鼠50 
(1)
動物的選擇 
*
動物的品系:免疫動物與提供抗原的動物之間的種系差異越大越好。 
-
例如哺乳動物的抗原可選擇非哺乳動物來制備抗體。 
-
常用的動物有兔、羊、馬、豬等,以兔新西蘭兔,年輕,健壯,體重在2.5kg左右,雄性為zui常用。 
(2)
佐劑 (adjuvant) 
*
一般可溶性抗原注射后,迅速從注射部位擴散、吸收代謝。佐劑可延長潴留時間,且延長免疫刺激作用。因此在制備抗體的過程中,常將抗原和佐劑一起注射。 
*
zui常用的佐劑是弗氏佐劑,又分為: 
-
弗氏不*佐劑(Freund's incomplete adjuvant) 
-
弗氏*佐劑(Freund's complete adjuvant) 
弗氏不*佐劑 

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