組織的非特異性染色的機理很復雜,其產生的原因主要可分為以下幾點:
(1)一部分熒光素未與蛋白質結合,形成了聚合物和衍化物,而不能被透析除去
。
(2)抗體以外的血清蛋白與熒光素結合形成熒光素脲蛋白,可與組織成分結合。
(3)除去檢查的抗原以外,組織中還可能存在類屬抗原(如Forssman氏抗原),可與組織中特異性抗原以外之之相應抗體結合。
(4)從組織中難于提純抗原性物質,所以制備的免疫血清中往往混雜一些抗其他組織成分的抗體,以致容易混淆。
(5)抗體分子上標記的熒光素分子太多,這種過量標記的抗體分子帶過多的陰離子,可吸附于正常組織上而呈現非特異性染色。
(6)熒光素不純,標本固定不當等。
Western bloting是用來對蛋白質進行檢測的一種常用方法,通過抗原抗體的免疫反應可以定量測出抗體的相對分子量,以及抗體的相對豐度或與已知抗原的關系等等。目前它應用在多個領域,在臨床上檢測傳染病和自身免疫病、過敏癥等,在抗體生產領域它與ELISA、ICC、IHC、IFA等免疫技術相接合已成為單克隆抗體生產的主要篩選手段。
在單抗的篩選過程中通常釆用幾中免疫技術并存的方式進行篩選,針對不同的抗體釆用不同的技術,有利于提搞抗體生產的篩選效率
Anti-VHL/FITC 熒光素標記一種腫瘤抑制因子抗體IgG |
Anti-Vimentin/FITC 熒光素標記波形蛋白抗體IgG |
Anti-VIP/FITC 熒光素標記血管活性腸肽抗體蛋白抗體IgG |
Anti-Visfatin-1/PBEF1(NT)/FITC 熒光素標記內脂素/內臟脂肪素/腹脂素/內肥素 抗體IgG |
Anti-Visfatin-1/PBEF1(NT) hu、 mo、 rat、MK /FITC 熒光素標記內脂素/內臟脂肪素(N端抗體)IgG |
Anti-Visfatin-1/PBEF1(NT) Human /FITC 熒光素標記內脂素/內臟脂肪素(N端抗體)IgG |
Anti-Visfatin-2(CT)/FITC 熒光素標記內脂素/內臟脂肪素(C端抗體)IgG |
Anti-VPS18/FITC 熒光素標記空泡分選蛋白18抗體IgG |
Anti-VR1/FITC 熒光素標記辣椒素受體抗體IgG |
Anti-VSIG4 /FITC 熒光素標記T淋巴細胞負調節蛋白之一抗體IgG |
Anti-VSV-G tag/FITC 熒光素標記VSV-G tag標簽抗體IgG |
Anti-VSV-G tag/HRP 辣根過氧化物酶標記VSV-G tag標簽抗體IgG |
Anti-VTG/FITC 熒光素標記卵黃蛋白原抗體IgG |
Anti-VTN/FITC 熒光素標記玻璃粘連蛋白抗體IgG |
Anti-VWCE/URG11/FITC 熒光素標記乙型肝炎病毒X蛋白(HBxAg)抗體IgG |
Anti-VWF/FITC 熒光素標記血管假性血友病因子/血管性血友病因子抗體IgG |
Anti-WDR26 /Gold 膠體金離子標記Gβ類似蛋白WDR26抗體IgG |
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