消除熒光抗體非特異性染色的方法應根據產生的原因采取適當的方法,常用的方法有以下幾種:
動物臟器粉末吸收法
常用肝粉(豬、大白鼠或小白鼠),其次是骨髓粉、鼠腦粉和雞胚粉等。每毫升熒光抗體中加入肝粉50~100mg,在離心管中充分混勻,在室溫中振動2h,4℃中過夜,再攪拌10min,高速離心(3000~15000r/min)30min,1~2次后,即可使用其上清液。吸收一般應在臨用前進行,吸收后之熒光抗體保存冰箱中勿超過2周。染色應作吸收前后之比較,吸收時可先用緩沖鹽水將組織干粉浸濕,離心(3000~15000r/min)30min,除去上清液,再加入熒光抗體進行吸收,以免消耗過多的抗體。
肝粉或新鮮細胞吸收是一種非特異性的消除方法,對熒光抗體的熒光色素和蛋白都有吸附作用。如檢查組織中的病毒抗原時,也可用相同的組織干粉或勻漿沉淀物吸收之。
用臟器肝粉吸收對熒光抗體損失較多,如果根據Hiramotos氏等的方法將組織的20%生理鹽水勻漿液,用生理鹽水洗2~3次,12000r/min
10min離心沉淀,用其沉淀物吸收其熒光抗體即能*達到目的,京極方久氏認為這樣吸收對熒光抗體幾乎沒有損失,他們常用此法,效果甚佳,吸收后放置一周左右,用時有必要再吸收一次。
Anti-VIP/FITC 熒光素標記血管活性腸肽抗體蛋白抗體IgG |
Anti-Visfatin-1/PBEF1(NT)/FITC 熒光素標記內脂素/內臟脂肪素/腹脂素/內肥素 抗體IgG |
Anti-Visfatin-1/PBEF1(NT) hu、 mo、 rat、MK /FITC 熒光素標記內脂素/內臟脂肪素(N端抗體)IgG |
Anti-Visfatin-1/PBEF1(NT) Human /FITC 熒光素標記內脂素/內臟脂肪素(N端抗體)IgG |
Anti-Visfatin-2(CT)/FITC 熒光素標記內脂素/內臟脂肪素(C端抗體)IgG |
Anti-VPS18/FITC 熒光素標記空泡分選蛋白18抗體IgG |
Anti-VR1/FITC 熒光素標記辣椒素受體抗體IgG |
Anti-VSIG4 /FITC 熒光素標記T淋巴細胞負調節蛋白之一抗體IgG |
Anti-VSV-G tag/FITC 熒光素標記VSV-G tag標簽抗體IgG |
Anti-VSV-G tag/HRP 辣根過氧化物酶標記VSV-G tag標簽抗體IgG |
Anti-VTG/FITC 熒光素標記卵黃蛋白原抗體IgG |
Anti-VTN/FITC 熒光素標記玻璃粘連蛋白抗體IgG |
Anti-VWCE/URG11/FITC 熒光素標記乙型肝炎病毒X蛋白(HBxAg)抗體IgG |
Anti-VWF/FITC 熒光素標記血管假性血友病因子/血管性血友病因子抗體IgG |
Anti-WDR26 /Gold 膠體金離子標記Gβ類似蛋白WDR26抗體IgG |
Anti-WDR26/FITC 熒光素標記Gβ類似蛋白WDR26抗體IgG |
Anti-WEE1 protein/FITC 熒光素標記WEE1蛋白抗體IgG |
Anti-Wnt1/FITC 熒光素標記信號通路Wnt1抗體IgG |
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