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牛Apo-H ELISA試劑盒

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更新時間:2017-06-08 04:03:29瀏覽次數:381次

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牛Apo-H ELISA試劑盒實驗原理:

用純化的MT抗體包被微孔板,制成固相載體,往微孔中依次加入標本或標準品、*化的MT抗體、HRP標記的親和素,經過*洗滌后用底物(TMB)顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的MT呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計算樣品濃度。

產品規格:48T/96T

產品用途:僅供科研使用

檢測范圍:15.6 pg/ml - 1,000 pg/ml

性:本試劑盒可同時檢測重組或天然的,且與其它相關蛋白無交叉反應

牛Apo-H ELISA試劑盒操作步驟:

實驗開始前,各試劑均應平衡至室溫,試劑不能直接在37 溶解;試劑或樣品配制時,均需充分混勻,混勻時盡量避免起泡。實驗前應預測樣品含量,如樣品濃度過高時,應對樣品進行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應的稀釋倍數。

1 加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液 100 ,余孔分別加標準品或待測樣品100 ,注意不要有氣泡,加樣 時將樣品加于酶標板底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37 溫育2小時。為保證實驗結果有效

性,每次實驗請使用新的標準品溶液。

2 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100 (臨用前配制),酶標板加上覆膜,37 溫育1小時。

3 棄去孔內液體,甩干,洗板 3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400 /每孔,甩干(也可輕拍將孔內液體拍干)。

4 每孔加檢測溶液B工作液(臨用前配制)100 ,加上覆膜,37 溫育1小時。

5 棄去孔內液體,甩干,洗板5次,方法同步驟3

6 每孔加底物溶液90 ,酶標板加上覆膜37 避光顯色(反應時間控制在15-30分鐘,當標準孔的前3-4孔有明顯的梯度藍色,后3-4孔梯度不明顯時,即可終止)。

7 每孔加終止溶液50 ,終止反應,此時藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與底物 液的加入順序相同。

8 立即用酶標儀在450nm波長測量各孔的光密度(OD值)。

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