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下面的內(nèi)容就是白介素試劑盒的三項必知作用:
1.酶和底物:在ELISA中zui常用的酶為HRP和ALP。
2.抗原:在ELISA中應(yīng)用的抗原要求有較高的特異性、親和力和純度。主要有3類,即自然抗原、人工合成抗原和基因重組抗原。自然抗原的純度不高,特異性不強;合成抗原一般為多肽片段,缺乏天然抗原所具有的立體結(jié)構(gòu)表位,親和力不高,可能導致相應(yīng)表位的抗體漏檢;基因重組抗原具有安全、特異性強、親和力高、產(chǎn)量大等特點,是一種比較理想的抗原,但其純化比較困難。
3.抗體:在ELISA中應(yīng)用的抗體可分為多克隆抗體(多抗)和單克隆抗體(單抗)。多抗取白免疫動物的抗血清,制備較簡單,但抗血清成分復雜,除含針對抗原(多個表位)的抗體外,還含有多種其他抗體,親和力和特異性相對要低于單抗,且制備周期長,批間差異較大。而單抗僅針對抗體的單一表位,親和力和特異性均較多抗高,且制備技術(shù)成熟,產(chǎn)量大,批間差異小,但結(jié)合位點的單一也正是其弱點之所在,在雙抗體夾心法中,如包被和指示抗體使用同一單抗,則由于結(jié)合位點的缺乏,容易造成假陰.性結(jié)果。在使用雙單抗一步法時,應(yīng)注意抗原過剩時的“鉤狀效應(yīng)"。
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