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較早用于免疫測定的基因工程抗原是HBcAg和HBsAg,這兩種基因工程抗原的出現,較好地解決了抗HBc和HBe的測定問題。因為要從病毒本身去大量獲取這兩種純抗原較為困難,并且這一點對于難培養的病原微生物來說,如HIV、HCV和梅毒螺旋體等都有些共性。
下面我們來了解下ELISA試劑盒:
一、HCV-ELISA:HCV目前尚不能體外培養,只能用基因工程或化學合成方法獲取HCV結構和非結構區的各種抗原片斷,已知HCV基因組有7個功能區組成:核心、E1、E2/NS1 NS2 NS3 NS4 NS5(有分為NS和NS5b)區,合成抗原的優點是易于純化,特異性好,抗原抗體反應強。
二、*代抗HCV-ELISA :由美國ortho公司克隆C1003抗原幾個片斷與人超氧化物歧化酶(SOD)結合。用酵母從病毒基因組非結合區得到表達,表達為融合蛋白,亦作為包被固相載體。
三、第二代HCV-ELISA試劑盒:用基因重組的HCV結構蛋白與非結構蛋白抗原包被固相載體。
四、第三代HCV-ELISA試劑盒 人工合成多肽抗原,由36個氨基酸組成的Cp9(內殼蛋白)和19個氨基酸組成Cp10混合包被固相載體。
五、第四代HCV-ELISA 試劑盒:美國新近推出一種包括HCV基因組7個功能區所有免疫決定基的單一融合蛋白,稱為多決定基融合抗原,采用表面活性劑處理分界病毒表面復合物,釋放HCV核心抗原(core)并用ELISA法,靈敏度可達500拷貝/ml,已接近核酸擴增檢測水平。
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