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蛋白胨細(xì)胞的三種培養(yǎng)方式
蛋白胨細(xì)胞的培養(yǎng)方式有三種:貼壁培養(yǎng)、微載體培養(yǎng)、無(wú)血清懸浮培養(yǎng)。這三種方式均可用于293細(xì)胞的大規(guī)模培養(yǎng)。293細(xì)胞在無(wú)Ca2+或含Ca2+培養(yǎng)基中可同樣生長(zhǎng),也可生長(zhǎng)在血清濃度降低的培養(yǎng)基中。單層培養(yǎng)細(xì)胞在5-10%FBS-DMEM中能生長(zhǎng)很好。一般來(lái)講,1:10傳代后,一周可以長(zhǎng)滿。嚴(yán)禁過(guò)度生長(zhǎng),這點(diǎn)很重要。
因?yàn)闀?huì)導(dǎo)致細(xì)胞密度加大和堆積,影響病毒斑的形成和轉(zhuǎn)染,傳代時(shí)也不易打散。懸浮的293細(xì)胞很容易大規(guī)模培養(yǎng)基,但不容易長(zhǎng)期保持穩(wěn)定。293細(xì)胞在傳代120次以后,其表型可能改變,生長(zhǎng)狀況不再*是單層的了,偶爾會(huì)形成局部的細(xì)胞成團(tuán)聚集,應(yīng)立即拋棄,重新引入新傳代的細(xì)胞。
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