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酶在保存中的注意事項(xiàng)

時(shí)間:2014-5-12閱讀:21755
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酶在保存中的注意事項(xiàng)

酶的保存條件的選擇必須有利于維護(hù)酶天然結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性,保存酶應(yīng)注意以下四點(diǎn):

溫度

酶的保存溫度一般在0-4℃,但有些酶在低溫下反而容易失活,因?yàn)樵诘蜏叵聛喕g的疏水作用減弱會(huì)引起酶的解離。此外,零度以下溶質(zhì)的冰晶化還可引起鹽分濃縮,導(dǎo)致溶液的PH值發(fā)生改變,從而可能引起酶巰基間連接成為二巰鍵,損壞酶的活性中心,并使酶變性。

緩沖液

大多數(shù)酶在特定的PH值范圍內(nèi)穩(wěn)定,偏離了這個(gè)范圍便會(huì)失活,這個(gè)范圍因酶而異,如*在酸性條件下穩(wěn)定,而固氮酶則在中性偏堿性條件下穩(wěn)定。

氧防護(hù)

由于巰基等酶分子基團(tuán)或Fe-S中心等容易為分子氧所氧化,故這類酶應(yīng)加巰基保護(hù)劑或在氬氣或氮?dú)庵斜4妗?/span>

蛋白質(zhì)的濃度及純度

一般來說,酶的濃度越高,酶越穩(wěn)定,制備成晶體或干粉更有利于保存。此外,還可通過加入酶的各種穩(wěn)定劑如底物、輔酶、無機(jī)離子等加強(qiáng)酶穩(wěn)定性,延長(zhǎng)酶的保存時(shí)間。

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