酶在保存中的注意事項(xiàng)

酶的保存條件的選擇必須有利于維護(hù)酶天然結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性，保存酶應(yīng)注意以下四點(diǎn)：

溫度

酶的保存溫度一般在0℃-4℃，但有些酶在低溫下反而容易失活，因?yàn)樵诘蜏叵聛喕g的疏水作用減弱會(huì)引起酶的解離。此外，零度以下溶質(zhì)的冰晶化還可引起鹽分濃縮，導(dǎo)致溶液的PH值發(fā)生改變，從而可能引起酶巰基間連接成為二巰鍵，損壞酶的活性中心，并使酶變性。

緩沖液

大多數(shù)酶在特定的PH值范圍內(nèi)穩(wěn)定，偏離了這個(gè)范圍便會(huì)失活，這個(gè)范圍因酶而異，如*在酸性條件下穩(wěn)定，而固氮酶則在中性偏堿性條件下穩(wěn)定。

氧防護(hù)

由于巰基等酶分子基團(tuán)或Fe-S中心等容易為分子氧所氧化，故這類酶應(yīng)加巰基保護(hù)劑或在氬氣或氮?dú)庵斜４妗?/span>

蛋白質(zhì)的濃度及純度

一般來說，酶的濃度越高，酶越穩(wěn)定，制備成晶體或干粉更有利于保存。此外，還可通過加入酶的各種穩(wěn)定劑如底物、輔酶、無機(jī)離子等加強(qiáng)酶穩(wěn)定性，延長(zhǎng)酶的保存時(shí)間。

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