肽和雙縮脲反應

基于銅的蛋白的檢測，包括BCA和洛瑞方法，取決于上的公知的“縮二脲反應”，由此含有三個或更多個氨基酸殘基的肽形成一個著色螯合物配合物與二價銅離子（Cu2 +的）中的堿性環(huán)境中含有鈉酒石酸鉀。這成為雙縮脲反應為已知的，因為它是一個復雜的化學性質(zhì)相似的形式與有機化合物的縮二脲（NH 2-CO-NH-CO-NH 2）和二價銅離子。 過剩的脲和熱的產(chǎn)物，縮二脲，與銅的反應以形成光的藍色的四配位配合物。

圖雙縮脲反應。通過減少銅亞銅形式的銅離子，反應產(chǎn)生一種淡淡的藍紫色。
 結構的尿素，縮二脲和肽。由于多肽具有相似的結構，以縮二脲，它們是能夠由縮二脲反應與銅的絡合物。
單氨基酸和二肽不給雙縮脲反應，但三肽和多肽或蛋白質(zhì)發(fā)生反應，生成藍紫色絡合物，在540nm處吸收光的光。一個銅離子形成配位絡合物，四到六附近肽債券的著色。產(chǎn)生的顏色的強度是參與反應的肽鍵的數(shù)目成正比。因此，雙縮脲反應，是一個簡單的和快速的相同名稱的用于定量測定總蛋白濃度的比色試劑的基礎。的縮二脲測定的工作范圍是5-160mg/mL，這對于某些類型的工業(yè)應用是足夠的，但幾乎沒有足夠敏感的大部分蛋白質(zhì)的研究需要。