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278次蛋白質(zhì)含量使用數(shù)據(jù)分析
由于大多數(shù)蛋白質(zhì)檢測(cè),樣品蛋白濃度測(cè)定,通過比較分析的稀釋系列標(biāo)準(zhǔn),其濃度是已知的。蛋白質(zhì)樣品和標(biāo)準(zhǔn)的處理中相同的方式,通過將它們與測(cè)定試劑和使用分光光度計(jì)測(cè)量的吸光度的響應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)用于繪制或計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線。未知樣品的吸光率值,然后插值到的標(biāo)準(zhǔn)曲線,以確定它們的濃度的情節(jié)或公式。
這是概念上的簡(jiǎn)單和直接的比較方法確定為“未知”的濃度。然而,其在檢測(cè)中協(xié)議的執(zhí)行是復(fù)雜的移液和稀釋步驟,評(píng)價(jià)復(fù)制,空白校正和其他因素。這些步驟方面是必要的計(jì)算,以獲得zui終的決定,經(jīng)常會(huì)引起混淆。
原則的標(biāo)準(zhǔn)曲線分析
1.相同的檢測(cè)樣品直接比較:
樣品測(cè)??定的反應(yīng)直接彼此相媲美的是當(dāng)它們存在在*相同的方式處理。的蛋白質(zhì)的量的變化是在zui后的吸光度的差異(顏色強(qiáng)度)如果所有三個(gè)后續(xù)條件遇見的*可能的原因:
樣品溶解在相同的緩沖液中
同樣的地段和股票用于所有樣品的檢測(cè)試劑
所有的樣品混合,并在相同的時(shí)間和溫度的保溫
無移液錯(cuò)誤
當(dāng)然,不同的蛋白質(zhì),因?yàn)椴煌幕瘜W(xué)成分中的蛋白質(zhì)測(cè)定方法,將產(chǎn)生不同的吸光率值,即使在相同的濃度。這被稱為“蛋白 - 蛋白變異”或“蛋白質(zhì)的均勻性”,并更充分地討論的其他蛋白的方法的文章中。
2.單位等于單位:
用于表達(dá)的標(biāo)準(zhǔn)的計(jì)量單位是由相同的單元,將在相同的度量單位表示與未知樣品的計(jì)算值(即,zui終的查詢結(jié)果未知樣品的計(jì)量,用于標(biāo)準(zhǔn)定義) 。例如,如果標(biāo)準(zhǔn)的被表示為每毫升微克(微克/毫升),然后為未知的樣品,這是通過比較標(biāo)準(zhǔn)曲線,確定的值也表示為微克每毫升。
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