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上海珂淮儀器有限公司
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Sepax ProAqa Excel親和色譜柱

參  考  價(jià)面議
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)

產(chǎn)品型號(hào)

品       牌

廠商性質(zhì)代理商

所  在  地蘇州市

更新時(shí)間:2021-06-16 09:57:39瀏覽次數(shù):2537次

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Sepax ProAqa Excel親和色譜柱,適用于細(xì)胞系篩選或上游生物工藝優(yōu)化和質(zhì)量控制過(guò)程中快速準(zhǔn)確的單克隆抗體定量。填料是由平均粒徑20 µm、孔徑1000-2000 Å的均一的PS/DVB填料顆粒與重組蛋白A配體偶聯(lián)而成,該配體能與除IgG3以外的免疫球蛋白以及含F(xiàn)c的融合蛋白結(jié)合。填料具有機(jī)械強(qiáng)度,可以承受高流速和高壓操作。

Sepax ProAqa Excel親和色譜柱

概述

   ProAqa Excel親和色譜柱適用于細(xì)胞系篩選或上游生物工藝優(yōu)化和質(zhì)量控制過(guò)程中快速準(zhǔn)確的單克隆抗體定量。填料是由平均粒徑20 µm、孔徑1000-2000 Å的均一的PS/DVB填料顆粒與重組蛋白A配體偶聯(lián)而成,該配體能與除IgG3以外的免疫球蛋白以及含F(xiàn)c的融合蛋白結(jié)合。填料具有機(jī)械強(qiáng)度,可以承受高流速和高壓操作。

技術(shù)參數(shù)

ProAqa Excel

參數(shù)

填料基質(zhì)(粒徑, 孔徑)

均一的 PS/DVB(20 µm, 1000-2000 Å)

固定配體

重組蛋白A

色譜柱尺寸(內(nèi)徑×長(zhǎng)度)

2.1 mm x 30 mm

色譜柱材質(zhì)

不銹鋼

Z大壓力

200 bar

pH 范圍

1.2-13.0

Z大流速

5 mL/min

流速

1-3 mL/min

CIP

0.1 M NaOH

結(jié)合緩沖液 pH

6.6-7.5

壽命

>2000次進(jìn)樣

標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)樣量

10 µL

IgG 檢測(cè)濃度

0.029-40 mg/mL*

LOD

0.29 µg

 
(*UV 280 nm: 0.029 -7.500 mg/mL, UV 300 nm: 0.117-40.000 mg/mL)
 
圖1. ProAqa Excel 填料掃描電鏡圖

均一的Sepax填料顆粒(20 µm)  D90/D10<1.3  

訂貨信息

 
 
規(guī)格 內(nèi)徑×長(zhǎng)度 (mm×mm)

材質(zhì)

柱體積(mL

訂貨號(hào)

標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格

2.1×30

不銹鋼

0.1

271120980-2103S

定制規(guī)格

2.1×50

不銹鋼

0.17

271120980-2105S

4.6×35

不銹鋼

0.58

271120980-4603S

4.6×50

不銹鋼

0.83

271120980-4605S

4.6×100

不銹鋼

1.66

271120980-4610S

填料特性

? 快速的抗體滴度測(cè)定
流速快達(dá) 3 mL/min
總循環(huán)(含平衡)時(shí)間可小于0.5 min
? 線性響應(yīng)范圍高達(dá)40 mg/mL
UV 280 nm: 0.029 - 7.50 mg/mL, LOD 0.294 µg
UV 300 nm: 0.117 - 40.0 mg/mL
? 耐用性: > 2000次進(jìn)樣
? 重現(xiàn)性: 優(yōu)良的批間一致性
? 適用于不同含量的CHO細(xì)胞中蛋白的含量測(cè)定
? 兼容HPLC、UPLC 和FPLC 系統(tǒng)

空白對(duì)照

要使用高純度的緩沖液,緩沖液使用前需要排氣和過(guò)濾(0.22 μm)。進(jìn)樣前,請(qǐng)務(wù)必做空白對(duì)照,并仔細(xì)檢查峰積分結(jié)果中是否存在噪音或基線繪制不正確。為了降低結(jié)合緩沖液和洗脫緩沖液轉(zhuǎn)變時(shí)引起的基線波動(dòng),建議使用:
(a)50 mM磷酸鹽(pH 7.0),0.15 M NaCl作為起始/沖洗溶液。
(b)100 mM磷酸鈉,0.15 M NaCl(pH 2.5)或100 mM甘氨酸,0.15 M NaCl(pH 2.5)作為洗脫緩沖液。
這些是對(duì)信號(hào)噪音有效的洗滌/洗脫液。鹽酸(HCl)能使抗體變性,所以洗脫產(chǎn)品如果需要生物活性的話,不建議添加HCl。

起始/沖洗溶液

(a)大多數(shù)情況下,可以使用簡(jiǎn)單的緩沖液,例如10-100 mM的磷酸鹽或Tris。
(b)結(jié)合/洗脫緩沖液的pH范圍為6.0-7.5,但是請(qǐng)注意,在較高的pH范圍下結(jié)合力強(qiáng)。
(c)添加一些鹽(0.1-0.2 M NaCl或KCl)抑制蛋白間相互作用的非特異性吸附。

洗脫條件

對(duì)于分析應(yīng)用,使用25-100 mM磷酸鹽(pH 2.0-3.5),含或不含高達(dá)150 mM的NaCl。可以使用的其他洗脫緩沖液成分包括磷酸鈉、鹽酸、甘氨酸、檸檬酸鹽、醋酸鹽以及其他含低pH成分的緩沖液。
由于抗體的結(jié)合/洗脫行為因種類和亞類而異,因此應(yīng)憑經(jīng)驗(yàn)確定洗脫條件。

樣品準(zhǔn)備和上樣

為了保證高效結(jié)合和避免柱子濾片堵塞,樣品一般按以下方式準(zhǔn)備:
(a)溶解或交換樣品到起始/洗滌緩沖液,這對(duì)于大份樣品(大于25%柱體積)尤其重要。
(b)進(jìn)樣前離心或用0.22 μm濾膜過(guò)濾樣品。
(c)熱處理血清樣品(56℃加熱30 min)去除殘留的纖維蛋白原,它們會(huì)在多次運(yùn)行中阻塞色譜柱。
(d)盡可能對(duì)樣品脫脂,因?yàn)橹|(zhì)會(huì)引起不可逆的結(jié)垢。

為保證高效結(jié)合及避免填料和色譜柱污染,需要確認(rèn)上樣量:
(a) 圖2和圖3顯示了ProAqa Excel色譜柱的動(dòng)態(tài)測(cè)試范圍。
(b) 其他抗體的結(jié)合能力取決于抗體來(lái)源和亞類。
(c) 需要優(yōu)化結(jié)合和洗脫條件并用樣品確認(rèn),以確保達(dá)到結(jié)合平衡和*洗脫。
(d) 在分析應(yīng)用中,Z小和Z大載量應(yīng)該通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性確定(如圖2所示,對(duì)于樣品濃度在0.029-7.500 mg/mL的常用定量分析,可以將檢測(cè)波長(zhǎng)設(shè)置為280 nm。如圖3所示,如果樣品濃度較高(高達(dá)40 mg/mL),波長(zhǎng)可設(shè)置為300 nm。在該分析應(yīng)用中,建議使用雙波長(zhǎng)檢測(cè)(280 nm和300 nm)。

Sepax ProAqa Excel親和色譜柱

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