PIN ELISA試劑盒
1仔細閱讀說明書
2確定試劑盒在有效期內
3按說明書確定所有試劑齊全(數量、體積)
4標本制備要規范，每份標本體積要按2-3個復孔以上的量制備(貯存)，盡量分裝做備份。短期內無法實驗者，注意低溫保存
5準備好所有實驗額外所需物品，如試管、吸頭、移液器、離心機等
6根據檢測標本數量確定所需試劑的量
7按說明書將所用試劑平衡至室溫，配制所需試劑
DIY夾心法ELISA常見技術指南
8選擇抗體時選擇一個單抗和一個多抗進行配對；若選擇兩個單抗，必須識別不同表位的抗體；從同一家公司選擇抗體對。
9ELISA實驗中為了確定*信號和zui低背景應將捕獲抗體(0.5-4μg/ml)和檢測抗體(0.25-2μg/ml)在預實驗中進行彼此相抗的滴定。同時，應包括在適當范圍內的標準品的系列稀釋。按試劑說明書常規提供的范圍進行操作。
10標準品的配制：對于每種細胞因子應仔細閱讀說明書，注意每批的細節。在使用細胞因子前，瞬時離心試劑瓶，盡可能多地收回其中的細胞因子。根據每批說明書中的細節，將凍干的細胞因子復溶。
11一般待測抗原標準曲線的線性范圍的可通過將標準品做8次2倍系列稀釋從2000pg/ml到15pg/ml。可利用標準的ELISA操作流程、放大試劑盒、第三類試劑、或改變酶底物系統可在一定范圍內提高靈敏度。
12為了優化靈敏度，建議過夜孵育標準品和標本。
13若使用過氧化物酶作為顯色系統，應嚴禁在洗液和稀釋液中加疊氮鈉，疊氮鈉可抑制過氧化物酶的活性。
14當測定混合液體中的抗原時，如血清，建議在標本稀釋液中加不相干的Ig.
注意事項
1.此試劑為體外檢測試劑，效期內使用，試劑應視為傳染物，不同總批號的試劑不能混用。
2.使用前應將盒內各試劑取出，室溫放置至少30分鐘。
3.保存于2-8℃，請勿冷凍，有效期請見盒內標示。
4.濃縮洗滌液出現結晶后，請于37℃孵育15分鐘
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