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更新時(shí)間:2025-02-06 21:50:40瀏覽次數(shù):63次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來自 環(huán)保在線倍性育種,指通過改變?nèi)旧w的數(shù)量,產(chǎn)生不同的變異個(gè)體,進(jìn)而選擇性狀優(yōu)良變異個(gè)體培育新品種
倍性育種,指通過改變?nèi)旧w的數(shù)量,產(chǎn)生不同的變異個(gè)體,進(jìn)而選擇性狀優(yōu)良變異個(gè)體培育新品種。正常的配子細(xì)胞中所包含的染色體數(shù)或半數(shù)的體細(xì)胞染色體數(shù)稱為一套單倍染色體,用符號(hào)N表示。具有一個(gè)染色體組的細(xì)胞和由這樣的細(xì)胞組成的個(gè)體稱為單倍體(N) ,具有兩個(gè)染色體組的細(xì)胞或個(gè)體稱為二倍體(2N),具有兩個(gè)以上整套染色體組的細(xì)胞或個(gè)體則稱為多倍體,包括三倍體(3N)、四倍體(4N)等。
傳統(tǒng)的倍性鑒定主要采用常規(guī)壓片法鏡檢統(tǒng)計(jì)染色體數(shù)目,但采用這種方法很難尋找到分裂中期染色體分散良好并可進(jìn)行計(jì)數(shù)的細(xì)胞,尤其是對(duì)于染色體條數(shù)眾多的物種,而且整個(gè)過程耗時(shí)長,檢測效率低。采用流式細(xì)胞術(shù)(Flow Cytometry,F(xiàn)CM)進(jìn)行倍性分析大大提高了倍性分析的效率,幾分鐘就可以快速準(zhǔn)確檢測同一物種范圍內(nèi)不同倍性的樣品。FCM作為一項(xiàng)快速、高效的檢測技術(shù),被廣泛應(yīng)用于細(xì)胞分類學(xué)、植物遺傳學(xué)及植物生理學(xué)等研究領(lǐng)域中。
實(shí)驗(yàn)原理
首先通過物理方法使動(dòng)植物組織(植物一般是葉片,動(dòng)物一般是血液或者肌肉組織)中的細(xì)胞游離出來,再加入裂解液將細(xì)胞中的細(xì)胞核釋放出來,并打開DNA鏈,然后用DAPI染液將細(xì)胞核DNA上的A-T堿基對(duì)特異性染色,再用儀器檢測被染色的A-T堿基對(duì)發(fā)出的熒光強(qiáng)度,這個(gè)熒光強(qiáng)度對(duì)應(yīng)的就是一個(gè)細(xì)胞中DNA的含量。比如二倍體的熒光強(qiáng)度是50(橫坐標(biāo)),那么四倍體的熒光強(qiáng)度就是100(橫坐標(biāo))。縱坐標(biāo)是細(xì)胞數(shù)量的顯示。
實(shí)驗(yàn)方法與檢測設(shè)備
我們采用配置紫外激光光源的Sysmex-Partec CyFlow倍性分析儀,搭配Sysmex CyStain DAPI倍性分析試劑盒(兩步法)和CellTrics濾網(wǎng),在2min內(nèi)即可完成一個(gè)樣本的檢測,為您提供高效、準(zhǔn)確的檢測結(jié)果,并出具專業(yè)報(bào)告。實(shí)驗(yàn)步驟如下:
1)在裂解液中物理破碎動(dòng)植物組織,動(dòng)物組織一般是用剪刀剪碎,植物一般是葉片用鋒利的雙面刀片切碎。不同的組織樣本處理的方法各不相同;
2)將帶有裂解液的破碎的組織樣本過細(xì)胞濾網(wǎng)(常用的為sysmex公司的30umCellTrics濾網(wǎng))過濾以去除未切碎的組織塊;
3)加入4倍裂解液體積的染液,用手指輕彈混勻后上機(jī)檢測;
4)收集結(jié)果。
成功檢測案例
目前我們應(yīng)用這種方法成功檢測倍性的植物有:草莓,蘭花,番茄,水稻,擬南芥,小麥,玉米,牡丹,芍藥,獼猴桃,馬鈴薯,谷子,紫薇,百合,月季,柑橘,枇杷等;動(dòng)物有各種魚類,海參幼蟲,貝類等。
如果您有實(shí)驗(yàn)服務(wù)需要,請(qǐng)聯(lián)系我們,我們將竭誠為您提供真實(shí)可靠的實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)。
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