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雞新城疫病毒IgG抗體Elisa檢測試劑盒

時間：2012/3/9閱讀：1006

【產品簡介】

新城疫（Newcastle disease,ND）又名為雞瘟，是目前危害我過養殖業的主要禽流感業的主要禽流感傳染病之一，主要侵害雞，火雞，其他禽類和野雞類，引起呼氣道感染及免疫抑制，多年來一直在各類禽類群中廣泛存在，雖然有疫苗進行免疫接種，但免疫雞群仍然發病，給養禽業造成了巨大損失。

【使用意義】

①本產品用于雞血清抗體的檢測，以確定被檢雞是否感染過雞新城疫病毒或免疫雞體內抗體水平。

②評估雞群感染ND的風險程度。

③了解雛雞母源抗體水平，為ND免疫程序的制定提供參考。

【檢測原理】

本品系由包被新城疫病毒的微孔板和酶標記抗雞IgG及其他試劑組成，應用酶免間接法原理（ELISA）檢測雞血清或血漿中新城疫病毒IgG抗體。

【試劑盒組成】

1.	雞傳染性支氣管炎病毒抗原包被微孔板條	96T×1
2.	酶標記物	11ml×1
3.	樣品稀釋液	20ml×1
4.	顯色劑A	7 ml×1
5.	顯色劑B	7 ml×1
6.	洗滌液（用前1：25稀釋）	10 ml×2
7.	抗體陽性對照血清	0.6 ml×1
8.	抗體陰性對照血清	0.6 ml×1
9.	終止液	7 ml×1
10.	封板膜	3
11.	密封袋	1個
12.	說明書	1份

【使用方法】

1. 使用前將試劑盒置室溫30分鐘，恢復至室溫。

2. 取所需用量包被微孔板條，設空白、陰性及陽性對照各2孔，未用的板條盡快密封，2～8℃保存。

3. 陰性、陽性對照孔分別加陰性、陽性對照血清100μl；空白對照孔不加；樣品稀釋，血清每孔樣本先1：50稀釋后加100μl；蛋黃以1:100稀釋后每孔加100ul。

4. 混勻，置37℃溫浴30分鐘。

5. 扣去孔內液體，每孔加滿洗滌液，靜置60秒后棄去，重復洗滌5次，拍干。

6. 每孔加酶標記物100μl（空白孔除外）。

7. 置37℃溫浴30分鐘。

8. 洗滌，同步驟5。

9. 每孔依次加顯色劑A、顯色劑B各50μl，混勻，37℃避光反應10分鐘。

10. 每孔加終止液50μl，混勻，置酶標儀450nm處測各孔A值（建議用雙波長450nm、630nm）。

【結果判定】

1. 陰性對照：正常情況下，陰性對照孔A值≤0.1；

2. 陽性對照：正常情況下，陽性對照孔A值≥0.4；

3. 結果判定：

3.1 未曾免疫

臨界值（C.O.）的計算：臨界值=0.15+陰性對照孔均值；檢測標本A₄₅₀值≥臨界值判定為本試驗陽性；檢測標本A₄₅₀值＜臨界值判定為陰性。所有陰性、陽性對照和樣品的A值均須減去空白平均值后作為計算值；陰性對照孔A值大于0.10時應舍棄，如所有陰性對照孔A值都大于0.10時須重復實驗；陰性對照孔低于0.05時以0.05計算。

3.2 免疫雞群

檢測樣本A₄₅₀值≥0.45即血凝滴度≥6log2時有很好的保護；

0.45> A₄₅₀≥0.2時相應血凝滴度為5log2；

0.3> A₄₅₀≥0.2時相應血凝滴度為4log2，有一定保護力；

當A₄₅₀≤0.3時，建議加強免疫。

【注意事項】

1. 操作時必須戴手套，穿工作衣，嚴格健全和執行消毒隔離制度。

2. 試驗結果的判定必須以酶標儀讀數為準。

3. 樣品稀釋液應用加液器加注，并經常校對其準確性。

4. 洗滌時各孔均需加滿液體，防止孔口有游離酶不能洗凈。

5. 所有樣品洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。

6. 微孔板從冷藏環境中取出時應在室溫中平衡至潮氣干盡后方可，未用完的微孔板須放入有干燥劑的密封袋中保存。

7. 用于檢測的樣品應保持新鮮。

8. 剩余樣品及廢棄物應經121℃高壓蒸汽滅菌30分鐘，或用5.0g/L次氯酸鈉等消毒劑處理30分鐘后廢棄。

9. 不同批號試劑組分不得混用。

【保存與有效期】

于2～8℃避光保存，有效期自成品檢定合格之日起為12個月。

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