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人周期素依賴性激酶5(CDK5)ELISA Kit
上海裕平生物主要經營ELISA試劑盒 應用的一些說明 克服非特異性吸附 公司展臺: http://www.yupingbio.com
在ELISA中,非特異性吸附是值得注意的問題,如果抗原或抗體純化不過關,產生非特異性吸附是實驗操作中無法避免的。
但是,即使抗原抗體的純化達到一定水平,還是有可能產生非特異性吸附。例如塑料載體表面的吸附,為了避免非特異性顯色,需用含Tween20的PBS或生理鹽水作為洗脫液,吐溫 (Tween)就是指聚氧乙烯去水山梨醇脂肪酸酯,為非離子型的表面張力物質,常作為助溶劑。根據它與聚合山梨醇所結合的脂肪酸種類不同而進行吐溫編號,結合月桂酸的為吐溫20,結合棕櫚酸的為溫40,結合硬脂酸的為吐溫60,結合油酸的為吐溫80。在免疫酶技術中常用含吐溫20的PBS作洗滌劑或作稀釋樣品和酶標抗體(抗原)之用,它的洗滌效果要比牛血清蛋白溶液(0.5%)好,具有減少非特異性吸附和增強抗原抗體結合的作用。吐溫20的使用量一般在0.06%-0.1%.有學者認為,Tween20還有增強特異性反應的作用。另外,檢測血清和酶標記抗體用含0.5%-1%牛血清白蛋白(或0.1%白明膠)稀釋也能得到增強特異性吸附的作用。樣品首先用稀釋的健血清孵育,也有助于去除非特異性顯色。除此之外,反應的時間和掌握反應劑zui適濃度,也有助于克服非特異性吸附。
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