人免疫球蛋白重鏈（IgH）ELISA Kit

上海裕平生物主要經營ELISA試劑盒

應用的一些說明

克服非特異性吸附
在ELISA中，非特異性吸附是值得注意的問題，如果抗原或抗體純化不過關，產生非特異性吸附是實驗操作中無法避免的。
但是，即使抗原抗體的純化達到一定水平，還是有可能產生非特異性吸附。例如塑料載體表面的吸附，為了避免非特異性顯色，需用含Tween20的PBS或生理鹽水作為洗脫液，吐溫 （Tween）就是指聚氧乙烯去水山梨醇脂肪酸酯，為非離子型的表面張力物質，常作為助溶劑。根據它與聚合山梨醇所結合的脂肪酸種類不同而進行吐溫編號，結合月桂酸的為吐溫20，結合棕櫚酸的為溫40，結合硬脂酸的為吐溫60，結合油酸的為吐溫80。在免疫酶技術中常用含吐溫20的PBS作洗滌劑或作稀釋樣品和酶標抗體（抗原）之用，它的洗滌效果要比牛血清蛋白溶液（0.5%）好，具有減少非特異性吸附和增強抗原抗體結合的作用。吐溫20的使用量一般在0.06%-0.1%.有學者認為，Tween20還有增強特異性反應的作用。另外，檢測血清和酶標記抗體用含0.5%-1%牛血清白蛋白（或0.1%白明膠）稀釋也能得到增強特異性吸附的作用。樣品首先用稀釋的健血清孵育，也有助于去除非特異性顯色。除此之外，反應的時間和掌握反應劑zui適濃度，也有助于克服非特異性吸附。
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