Pierce 蛋白 A 瓊脂糖包含共價固定至高質量 6% 交聯的微珠化瓊脂糖上的純化天然蛋白 A。瓊脂糖微珠的物理和化學特性適用于各種批次或柱類型親和純化程序。
蛋白 A 是由多種菌株生成的一種細胞壁組分。蛋白為46.7kDa 的單鏈多肽,基本上不含碳水化合物。天然蛋白 A 包含四個高親和力 (Ka= 10^8/mol) 結合位點,能夠與選定哺乳動物物種的 IgG 類抗體 Fc 區相互作用。IgG 結合功能在 pH 值 8.2 時,但在中性和生理緩沖液(pH 值 7.0 至 7.6)也可高效結合。
蛋白 A 是一種源自細菌的蛋白,對抗體(尤其是 IgG 類抗體)的 Fc 部分具有高親和力和特異性。與其替代品(蛋白G)相比,蛋白A對兔、豬、狗和貓的 IgG亞類結合力。蛋白A對人IgG也具有較高的結合力,但對IgG3的結合力很弱。蛋白 A 與小鼠 IgG1 的結合作用也較弱,因此不推薦用于大多數包含該抗體同種型的應用。
Pierce 蛋白 A 瓊脂糖使用 Thermo Scientific AminoLink 偶聯化學法制備,該方法與傳統配基固定方法相比具有多項優勢。AminoLink 固定后,瓊脂糖珠的糖單體與蛋白 A 上的天然賴氨酸殘基通過簡單的酰胺鍵結合。與典型的溴化氰 (CNBr) 固定法不同,AminoLink 方法不引入任何新的化學基團,從而避免了可能導致的非特異性結合,并且形成基本不可逆的穩定結合。所得的高結合容量樹脂在多輪抗體純化之后仍然能保留固定化蛋白 A 的結合功能。