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上海昊量光電設備有限公司


光片(light sheet)顯微鏡模組

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更新時間:2024-02-13 14:15:37瀏覽次數:113次

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產品簡介

光片顯微鏡(lightsheetmicroscope)模組光片顯微鏡(lightsheetmicroscope)是一種快速而柔和的成像技術

詳細介紹

光片顯微鏡(light sheet microscope)模組


光片顯微鏡(light sheet microscope)是一種快速而柔和的成像技術。該技術憑借優(yōu)異的三維成像能力、分辨率、更低的光漂白性和光毒性被廣泛的用于生物醫(yī)學研究等領域

光片顯微鏡的(LSFM或SPIM)與傳統(tǒng)顯微鏡的不同在于激發(fā)光的照明方式,照明光路與探測光路垂直放置, 它的照明光是與一張與成像面平行的薄薄的光片,只有焦平面的樣品被照亮,而其上下的樣品不受影響。和傳統(tǒng)熒光照明方式相比,光片照明有如下優(yōu)點:

1)提高了圖像和背景的反差(Signal-to-Background Ratio) 和軸向分辨率:光片照明技術保證了焦平面上下的樣品不會被激發(fā),具備和共聚焦顯微鏡類似的光學切片功能;

2)減少了光漂白和光毒性:與傳統(tǒng)的熒光照明技術相比,光毒性可以被降低20-100倍,這樣,我們就能在更接近生理狀態(tài)的條件下,對活體生物樣品進行長時間的三維成像;

3)與激光共聚焦和雙光子顯微鏡使用低QE的PMT的點掃描成像相比,光片顯微鏡使用高QE的或相機進行面成像,大大提高了成像速度和圖像的信噪比。共聚焦需要幾分鐘甚至幾小時才能拍完的樣品,用光片顯微鏡只需要幾秒到幾分鐘。因此,光片顯微鏡也特別適合用于大樣品成像。

在多數光片系統(tǒng)中,光學元件是固定的,需要移動樣品 (或使光片從xyz方向掃過樣品) 來獲得完整的3D圖像。通過移動或旋轉樣品,可以對大樣品進行成像,并從多個角度拍攝,將這些多視角圖像通過特別算法融合在一起后,能夠進一步提高圖像分辨率,并修正一些光片技術的缺陷。

光片顯微鏡的搭建的主要困難在于各個組件的同步,例如相機和,激光和光片的產生等。為了方便客戶自主搭建該設備,上海昊量光電設備有限公司推出了光片顯微鏡模塊組件,客戶只需按照自己的需求購買激光激發(fā)光源,相機就可完成該系統(tǒng)的搭建,如有需要錢也提供整套解決方案。昊量光電推出的模塊主要包塊一下幾款產品:

1)雙向倒置光片顯微鏡模塊(DIM)

DISPIM是一款靈活的易于安裝的光片顯微鏡組件,該組件安裝到倒置顯微鏡上時可實現雙向觀測。該組件兩個物鏡垂直放置在開放式培養(yǎng)皿的樣品上方,物鏡與垂直方向成45°。該組件可以放置在常規(guī)倒置顯微鏡的頂部,也可安裝在我們提供的RAMM/MIM框架組件上。

                        

該組件有兩種配置:

①單面系統(tǒng)(iSPIM)

該系統(tǒng)一個物鏡通過常規(guī)的產生移動光片,使光片穿過樣品,通過振鏡移動光片同時移動臺完成3D成像。該系統(tǒng)圖像獲取樣品迅速,低成本,但是軸向分辨率低于XY平面分辨率。

②雙面系統(tǒng)(diSPIM)

在該系統(tǒng)中兩邊都包含光片掃描儀、壓電物鏡和相機,在實驗中兩個物鏡交替用于照明和檢測,同時在正交方向獲得樣品的圖像,并且將兩個方向的收集的數據集進行計算合并生成各向同性的3D圖,如果實驗需要也可以單面模式運行。該模塊XY&Z軸都具有較好的分辨率,但是需要購置更多的硬件,且后期需要更多的圖像處理。

2)透明組織專用光片顯微鏡(ct-SPIM)

該光片顯微鏡的外形結構與diSPIM/iSPIM結構類似,但是不包括倒置顯微鏡。該系統(tǒng)配置經過優(yōu)化可對透明組織進行成像。樣品放置在電動XYZ平臺上,由于樣品尺寸較大,平臺掃描是其成像的可行方式。采集速度受相機幀頻限制。該模塊也是擁有兩種不同配置,即單面成像和雙面成像系統(tǒng)。

3)傾斜單面光片顯微鏡(OSPIM)

OSPIM系統(tǒng)是一個單面光片系統(tǒng),上面物鏡以60°傾角安裝在RAMM框架上,底測顯微鏡物鏡用于產生光片,該平臺可以安裝在商業(yè)上的倒置顯微鏡上。

                           

此外還提供了搭建光片顯微鏡中常用的模組,

1)耦合激光掃描儀

光纖耦合激光掃描儀是一款緊湊而通用的2D掃描單元。設計適用于生成SPIM光片。用戶提供的光束通過標準光纖連接器進入掃描儀,通過二維MEMS掃描成光片。掃描儀通常使用C型接口連接到顯微鏡上。

2)多重浸漬物鏡

該物鏡主要設計用于光片顯微鏡檢查透明組織樣品。由于物鏡具有的彎曲表面,因此物鏡可以在沒有任何校正環(huán)的情況下工作在任何折射率的介質中。物鏡可以浸入到苛刻的介質,例如DBE和BABB。



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