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更新時間:2022-09-06 16:42:18瀏覽次數(shù):99次
聯(lián)系我時,請告知來自 環(huán)保在線分辨率媲美N-SIM的個人超分辨率顯微鏡N-SIME運用結(jié)構(gòu)照明顯微鏡技術(shù),實現(xiàn)了2倍于傳統(tǒng)光學顯微鏡的空間分辨率(約115nm)
N-SIM E實現(xiàn)高速超分辨圖像獲取,時間分辨率約1秒/幀,支持活細胞高分辨成像。
● 3D-SIM模式提供Z軸超高分辨率成像
Slice 3D SIM模式用于300nmZ軸分辨率的光學斷層超分辨率成像。Stack 3D-SIM模式(選配)用于厚樣品的多層序列超分辨率成像,具有比Slice 3D-SIM模式更高的成像對比度。
超分辨成像(Slice 3D SIM 模式) 傳統(tǒng)寬場成像
尼羅紅標記的枯草芽孢桿菌細胞膜(紅色),和GFP標記的細胞分裂蛋白DivIVA(綠色)。超分辨率顯微鏡可以精確定位細胞分裂過程中的相關(guān)蛋白。
圖片由紐卡斯爾大學細菌細胞生物學中心, Henrik Strahl博士和 Leendert Hamoen 博士提供。
Stack 3D SIM 模式(立體視圖) Stack 3D SIM模式(投射)
Alexa Fluor 488標記小鼠角質(zhì)細胞中的角蛋白中間纖維。
圖片由德國亞琛工業(yè)大學,Reinhard Windoffer博士提供。
♦ 結(jié)構(gòu)照明顯微鏡原理
使用高空間頻率的激光干涉照明標本,標本內(nèi)的亞分辨結(jié)構(gòu)產(chǎn)生莫爾條紋,這些莫爾條紋中包含標本經(jīng)過調(diào)制的亞分辨率結(jié)構(gòu)信息。捕獲莫爾條紋并通過影像技術(shù)進行處理,可復原未知的樣品信息,實現(xiàn)超越傳統(tǒng)光學顯微鏡極限的分辨率。
條紋圖案照明輻射配合一直的空間頻率,能夠獲取莫爾條紋等細微結(jié)構(gòu)的信息。
在此處理過程中,捕獲道德莫爾條紋影像包含標本內(nèi)微小結(jié)構(gòu)的信息。顯微鏡對結(jié)構(gòu)照明的多個相位和方向進行捕捉,并從莫爾條紋信息中提取出“超分辨率”信息。然后顯微鏡將此信息以數(shù)學方式組合到“傅立葉”或孔徑空間中,接著將其轉(zhuǎn)換回影像孔徑,從而產(chǎn)生分辨率兩倍于傳統(tǒng)顯微鏡的影像。
使用高頻條紋照明使分辨率翻倍
高分辨率、高空間頻率信息的捕捉收到物鏡數(shù)值孔徑(NA)的限制,且超過光學系統(tǒng)孔徑的結(jié)構(gòu)孔徑頻率被去除(圖A)。
圖A:分辨率受到物鏡NA的限制
圖B:結(jié)構(gòu)照明和標本中物鏡無法分辨出的細微結(jié)構(gòu)共同作用,產(chǎn)生莫爾條紋
圖C:捕捉到約為NA角度兩倍角度的射線
●超分辨率顯微鏡專用物鏡
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