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上海玉研科學儀器有限公司
COPAS VISION 流式細胞儀
模式生物由于其結構簡單、生活周期短、培養簡單、基因組小等特點,在生物醫學等域發揮重要作用。模式生物作為材料不僅能回答生命科學研究中基本的生物學問題,對人類一些疾病的病理解析和治療也有重大的借鑒意義。
在許多模式生物研究中,研究人員需要對各種小型模式生物,如秀麗線蟲、斑馬魚幼魚、果蠅、擬南芥等進行觀察和分選。對于傳統流式細胞儀來說,小型模式生物粒徑過大且很脆弱,很容易在實驗過程中破碎或死亡,而鏡下手動分選繁瑣且枯燥,分選充滿主觀因素,因而限制了實驗的規模和準確率。為了這一空白,在1998年,COPAS 系統(大粒徑復雜顆粒物參數分析和分選儀)應運而生。
COPAS 系統是 Union Biometrica 公司基于傳統流式細胞儀原理設計發明的一款用于大粒徑顆粒物全自動高通量分析分選平臺,因先應用于秀麗線蟲高通量藥物篩選,COPAS 系統又被人稱作“線蟲篩選器”。其通過自動化代替了耗時的手工分選過程,大大減少了實驗所需的時間,消除人為誤差,實現了以無法想象的高通量藥物篩選。
COPAS VISION 與初的 COPAS 流式細胞平臺一樣,提供了對活的多細胞生物、細胞簇、單細胞、種子和無機顆粒等對于傳統流式細胞儀來說太大或太脆弱樣品的自動化高通量分析和分選。此外,COPAS VISION 在更小的尺寸范圍內大大提高了檢測靈敏度,提高參數檢測數量的同時,增加了樣品明場成像功能,搭配 Profiler 高軟件可對樣品進行更加細致詳細的分析。
研究多細胞結構的實驗人員都知道,細胞形成群體結構之后,其信息交互和行為會與單細胞時明顯不同。COPAS VISION 大粒徑模式生物流式分選平臺系統儀允許實驗人員對組織、腫瘤或器官中的細胞與細胞之間的相互作用進行研究,而不需要用傳統的方法破壞其整體結構。而針對模式生物,COPAS VISION 可以代替手工分揀,提供快速、靈敏、溫和、重復性高的全自動化、高通量分析和分選功能。
型號:COPAS VISION
利性技術原理
基于傳統流式細胞儀原理,樣品在壓力的作用下從連續攪拌的樣品杯進入流動室(FlowCell),在鞘液的包裹下形成一條狹窄的液流進入流動室中心,通過激光束的檢測。系統根據激光束檢測結果控制樣品的去留,默認狀態下,樣品被溫和的氣流引導至“回收容器”中,當系統接收到分選信號時,空氣分選器短暫關閉,含待分選樣品的液滴,即可直接流入對應容器中完成分選。
與傳統流式細胞儀相比,大粒徑流式分選平臺在幾個重要的設計上有所不同:
(1)大粒徑流動室可以容納 10-1500μm 樣本,比傳統流式細胞儀要大得多,使其能夠完成大粒徑生物樣本的高通量分選,包括但不限于秀麗線蟲、果蠅、蠶卵、斑馬魚、擬南芥、干細胞、胰島、花粉等;
(2)較慢的液流流速和較低的運行壓力,樣品分選過程中液流剪切力小,避免了高剪切力對生物樣本的損害,保證模式生物和多細胞樣本的生物活性;
(3)利氣壓分選技術,利用溫和氣流將生物樣本以液滴的形式進行分選,相比較傳統流式技術采用機械力或靜電電荷力進行分選,避免了生物樣品的破碎即失活。
除此之外,COPAS VISION 平臺增加了有的高速CCD明場成像系統,在樣品經過流動室的瞬間抓拍樣品形態圖片,從而輔助研究人員對樣品進行更加業細致的分析。
控制和分析軟件
FlowPilot 軟件為大粒徑流式分選平臺設計,平臺集成功能強大的硬件和用戶友好的軟件控制,能夠直觀地呈現各樣品參數,并通過多種不同的分選模式對各樣品逐一分選,獲得目標樣品及量化的樣品參數數據,方便、快捷且結果有據可循,特別適合于各種高通量微模式生物研究及大規模藥物篩選等域。
可使用 FlowPilot 控制軟件進行如下操作:
(1)根據個人喜好輕松地進行儀器控制、數據采集和分配選項面板的訪問或隱藏;
(2)自定義和操作多個獨立的統計圖像(各參數直方圖、X-Y關系圖等),包括每個區域的自定義縮放和邏輯門控選項;(3)檢索實驗文件、樣本模板和數據分析文件(在線或離線),為采集后再分析提供了強大的工具支持;
(4)創建自定義的分選輸出模板,用于對于多孔板中每個孔的分配信息進行設定;
(5)以標準的流式細胞儀格式存儲數據,以便以后使用實驗室中其他傳統的流式細胞儀軟件進行分析等;
Profiler/FlowPilot-ProTM
Profiler/FlowPilot Pro 高功能是在 FlowPilot 軟件基礎上,進一步對樣品個體光密度(EXT)和熒光參數(Red、Green、Yellow)的徑向分布進行掃描,獲得 Profiler 圖像,根據 Profiler 圖形可對生物樣品進行進一步處理和分析。
Profiler 可以沿樣本軸向長度(TOF)進行多達8000個光學數據采樣,將數據采集從整體水平提升到器官和多細胞的水平。隨后,軟件以圖形和數字的形式呈現這些信號沿物體長度方向上的變化,向實驗人員顯示每個樣品在多個“光學剖面”上所有光學參數的地形圖及強度變化,以峰高、峰寬、峰數和相對位置的形式進行表現——所有參數都可作為后續的分選條件。
Partial Profiling
Profiler 的另一個分析特性是“Partial Profiling”部分剖析,在樣本上選定一個區域,“Partial Profiling”會顯示出該區域詳細光學或熒光特性(峰高、峰寬及數量等),以生成用戶自定義分選參數,“Partial Profiling”可以用于分析樣品部分區域的光學特性。
COPAS VISION 標配利性 FlowPilot-Pro 軟件平臺,集成功能強大的硬件和直觀的用戶控制,提高了光學靈敏度、流體力學參數調節和定量分選性能,為科研人員的實驗室提供了更高別的分析分選功能和用戶體驗,特別是在高通量篩選上系統性能更加、靈活性和易用性更加強大。
明場視覺成像
COPAS VISION 在大粒徑流式平臺基礎上提供圖像捕獲功能,這些圖像可直觀揭示分析樣品中不同顆粒的身份。對于由形態相似的對象組成的樣本而言,具有代表性的圖像并不重要。然而,大多數樣品類型是由不同種類的顆粒或生物的混合物,形狀各異,并以隨機方向通過流動池,對于這些樣本,隨附的圖像即可向流式數據提供更加詳細的信息。例如,小型底棲生物樣本、類器官和組織細胞簇樣品等。
COPAS VISION 收集的樣品數據由直方圖和各種點圖組成,根據選定圖形區域可以對樣品進行分析和分選。明場圖像的添加為研究人員提供了即時的對象識別,使實驗者可以更準確地確定每種類型顆粒的數量和濃度,測量形態特征,確認樣品顆粒的身份,以及用于樣品分選過程中的質量控制。
COPAS VISION 明場圖像采集在流式信號采集之后進行,而后同樣可通過 FlowPilot 圖像處理軟件進行分析,獲得感興趣區域(ROI)的寬度、高度、面積、周長、軸向長度、粗糙度和平均灰度等信息。數據可以以多種不同的方式查看和顯示,既可所有 ROI 集合輸出,也可以每個圖像及其相關指標單獨查看和顯示或單純存儲從圖像分析導出的數據。
硬件設計
固定流動室設計,用性強。COPAS VISION 為用性設計,每臺機器只能用于某個固定粒徑范圍樣品分析分選使用;
根據系統所配置的流動室光學核心模塊(Fluidics and Optics Core Assemblies,FOCA)的不同,COPAS VISION 系統可分為四種不同的型號。下表為不同規格 COPAS VISION 系統所適用的樣品粒徑范圍以及常用的研究對象。
更新時間:2022/11/20 1:00:24
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