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YIJI冰凍切片特恩布爾（TURNBULL）鐵（二價(jià)）染色試劑盒產(chǎn)品說明書（中文版）

主要途

YIJI冰凍切片特恩布爾（TURNBULL）鐵（二價(jià)）染色試劑是一種旨在使用氰正鐵酸鹽結(jié)合反應(yīng)技術(shù)，分析冰凍組織切片中二價(jià)亞鐵離子（ferrous ion）沉積現(xiàn)象的而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心改良TURNBULL方法、成功實(shí)驗(yàn)證明的。主要適用于冰凍組織切片的二價(jià)亞鐵離子檢測(cè)。廣泛用于血液細(xì)胞或組織病理生li的研究。產(chǎn)品嚴(yán)格無(wú)菌，即到即用，操作簡(jiǎn)捷，性能穩(wěn)定，顯色清晰。

技術(shù)背景

二價(jià)鐵（ferrous）是氧化數(shù)為二的鐵。二價(jià)鐵溶解性好，生物學(xué)效價(jià)優(yōu)于三價(jià)鐵，因此鐵首先應(yīng)被還原為二價(jià)鐵，才容易被生物體吸收利用。動(dòng)物和人體的整個(gè)消化道都可以吸收，植物在根尖處吸收。機(jī)體大約有三分之二的鐵存在于紅細(xì)胞的血紅蛋白和肌肉的肌紅蛋白中，20％的鐵以不同形式存在于肝、脾和其他組織中。鐵作為氧的載體，保證組織內(nèi)氧的正常輸送，在細(xì)胞生物氧化和能量代謝過程中發(fā)揮著重要作用。 通過酸性氰正鐵酸鹽（ferricyanide）與組織中二價(jià)正鐵離子（ferrous ion）結(jié)合，成為鐵氰亞鐵（ferrous ferricyanide），而呈現(xiàn)不溶性亮藍(lán)色色素，又稱為特恩布爾藍(lán)或騰氏藍(lán)（turnbull blue）。其反應(yīng)原理如下：

品內(nèi)容

YIJI清理液（Reagent A）   毫升

YIJI固著液（Reagent B）   毫升

YIJI染色液（Reagent C）   毫升

YIJI酸性液（Reagent D）   毫升

YIJI飽和液（Reagent E）   毫升

YIJI澄清液（Reagent F）   毫升

YIJI脫水液（Reagent G）   毫升

YIJI透明液（Reagent H）   毫升

產(chǎn)品說明書   1份

保存方式

保存在4℃冰箱里；YIJI染色液（Reagent C），避免光照；試劑具有腐蝕性和毒性，注意操作安全；有效保證6月

用戶自備

核固紅復(fù)染試劑盒（YJ40011）：用于常規(guī)染色后復(fù)染

2毫升離心管：用于染色工作液配制的容器

小型染色缸：用于組織細(xì)胞染色操作

光學(xué)顯微鏡：用于組織細(xì)胞染色后觀察分析

實(shí)驗(yàn)步驟

• 樣本固著處理
• 取出待測(cè)的5微米厚的冰凍切片  
• 小心加上xx微升YIJI清理液（Reagent A）在切片上，鋪滿整個(gè)樣品表面
• 小心移去切片上的YIJI清理液（Reagent A）
• 小心加上xx微升YIJI固著液（Reagent B），鋪滿整個(gè)樣品表面
• 室溫下，孵育10分鐘
• 小心移去切片上的YIJI固著液（Reagent B）
• 小心加上xx微升YIJI清理液（Reagent A），清洗樣品表面
• 小心移去切片上的YIJI清理液（Reagent A）
• 重復(fù)實(shí)驗(yàn)步驟7至8一次

二、樣本染色處理

操作開始前，將4℃冰箱里的試劑盒中的YIJI染色液（Reagent C）和YIJI酸性液（Reagent D）置入室溫下，分別移出1毫升到2.2毫升離心管，混勻后，標(biāo)記為YIJI染色工作液，用錫箔紙包裹，避免光照。然后進(jìn)行下列操作。

• 小心加上xx微升YIJI染色工作液，鋪滿整個(gè)切片樣品表面
• 室溫下孵育60分鐘；或直至可見籃色
• 小心移去切片上的YIJI染色工作液
• 小心加上xx微升YIJI飽和液（Reagent E），清洗樣品表面
• 小心移去切片上的YIJI飽和液（Reagent E） 

三、 樣本復(fù)染處理

• （選擇步驟）樣本復(fù)染處理（核固紅）
• 小心加上xx微升YIJI澄清液（Reagent F）在切片上，鋪滿整個(gè)切片樣品表面
• 小心移去切片上的YIJI澄清液（Reagent F）
• 小心加上xx微升YIJI脫水液（Reagent G）在切片上，鋪滿整個(gè)切片樣品表面
• 小心移去切片上的YIJI脫水液（Reagent G）
• 小心加上xx微升YIJI透明液（Reagent H）在切片上，鋪滿整個(gè)切片樣品表面
• 小心移去切片上的YIJI透明液（Reagent H）
• 放上蓋玻片或封片
• 即刻在一般光學(xué)顯微鏡下觀察：二價(jià)鐵沉積陽(yáng)性細(xì)胞呈現(xiàn)亮藍(lán)色（如果復(fù)染：細(xì)胞質(zhì)呈現(xiàn)粉紅色，細(xì)胞核呈現(xiàn)紅色）

注意事項(xiàng)

• 本產(chǎn)品為50次操作
• 本產(chǎn)品可以用來鑒別組織或細(xì)胞中出現(xiàn)黃棕色的色素是屬于那一種，如是含鐵血黃素，可證明是何價(jià)位的鐵離子，如肺郁血、出血、陳舊的出血灶、肝硬化時(shí)慢性脾郁血、硬化性血管瘤、動(dòng)脈瘤性骨囊腫、絨毛血素滑膜炎等
• 操作時(shí)，須戴手套和防護(hù)面罩
• 建議在通風(fēng)柜里操作
• 所有操作在室溫下進(jìn)行
• 試劑具有腐蝕性和毒性，注意操作安全
• 每次更換試劑溶液時(shí)，保持切片面基本晾干。空氣中晾干狀態(tài)為沒有水滴，呈濕潤(rùn)狀態(tài)，可見反光
• 試劑溶液在切片表面時(shí)，避免有氣泡存在，同時(shí)確保鋪滿切片表面
• 樣品染色避免過度，肉眼可見藍(lán)色即可終止染色
• 建議使用YIJI核固紅復(fù)染試劑盒（YJ40011）
• 組織細(xì)胞染色完成后，即刻進(jìn)行光學(xué)顯微鏡觀察 
• 本公司提供系列組織細(xì)胞金屬元素染色試劑產(chǎn)品

質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

• 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定
• 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定顯色清晰

訂購(gòu)信息

單組份訂購(gòu)信息

編號(hào) 名稱 規(guī)格

YJ80047.5 YIJI冰凍切片特恩布爾（TURNBULL）鐵（二價(jià)）染色試劑盒 50次

YJ80047.  YIJI清理液（Reagent A） 毫升

YJ80047.5B YIJI固著液（Reagent B） 毫升

YJ80047.5C  YIJI染色液（Reagent C） 毫升

YJ80047.5D YIJI酸性液（Reagent D） 毫升

YJ80047.5E YIJI飽和液（Reagent E） 毫升

YJ80047.5F YIJI澄清液（Reagent F） 毫升

YJ80047.5G  YIJI脫水液（Reagent G） 毫升

YJ80047.5H YIJI透明液（Reagent H） 毫升

試劑盒訂購(gòu)信息