用途范圍： 科研實驗 不得用于臨床診斷

純度： 99 %

產地： 上海

品牌： 科翰盛生物

規格： 25T 50T

貨號： KHS-21420

本試劑盒可用于檢測食品或其他材料中是否有的成分。現代食品加工工藝極大改變了食材原有的味道、氣味、色澤、紋理和質地等特性,因此傳統的感官鑒別技術已經無法對食材的真偽進行準確的鑒定。同時部分食材還有致敏性,因此基于基因檢測的快速靈敏的食材來源檢測技術將對食品監管和安全提供重要的保障。本產品就是為滿足這一需求根據 PCR 原理開發的產品,它具有下列特點:

1. 一管式操作,用戶只需要提供樣品即可。

2. 根據大豆熱休克蛋白基因保守區域設計引物,能專一性檢測出樣品中的大豆成分,但不能檢測其他非大豆成分。

3. 快速,整個檢測過程(按一個樣品計)所需時間僅為 2.0 小時。

4. 只需要普通 PCR 儀和凝膠電泳儀,無需配置貴重儀器設備。

5. 對混合樣品中大豆成分的檢測下限為 0.1%,對樣品中大豆成分的核酸檢測下限為 1.0ng/μL。

6. 本只能用于科研,足夠 50 次 40uL 體系的常規 PCR。

白色念珠菌PCR試劑盒包裝規格及成分:

注:試劑五(DNA 釋放劑試用裝)包含以下3種成分:試劑六(免 DNA 提取試劑溶液 A 成分一);試劑七(免 DNA 提取試劑溶液 A 成分二);試劑八(免 DNA 提取試劑溶液 B)

運輸及保存:低溫運輸,-20℃保存,有效期一年。使用本試劑盒提供的陽性對照時,由于其濃度較高,一定要注意不要污染其他試劑和成分。*在專門的區域操作。

自備試劑:DNA 模板。

白色念珠菌PCR試劑盒使用方法:

一、樣品 DNA 的制備

1. 用自選方法純化樣品的 DNA,本產品跟市場上絕大多數核酸純化產品兼容。

2. 如果有 N 個樣品,則需要進行 N+2 個樣品提取,多出的一個用作樣品制備陽性對照管、另一個用作樣品制備陰性對照管。如果用本試劑盒自帶的DNA 釋放劑試用裝。則按下面步驟操作:

3. 配制溶液 A 工作液。以配制 1mL 工作液(足夠 10 個樣品)為例:在一干凈塑料管中加入 10uL 溶液 A 成分一,20uL 溶液 A 成分二和 970uL 超純水,充分混合均勻即可。溶液 A 工作液可室溫放置,但*在一周內用完,不要長期放置。一次檢測一個樣品需要 100uL 溶液 A 工作液,1mL 工作液足夠 10 個樣品。如果待測樣品數量為其他數字,配制的溶液 A 工作液的體積需要做相應的調整。

4. 在標記好的 N+2 個離心管中,加入 1-5mg 固體樣品(半粒芝麻大小)或 5uL 液體樣品待測樣品。在樣品制備陽性對照中加入 5uL 陽性對照,在樣品制備陰性對照中加入 5uL 水。

5. 在每個管中加入 100 uL 溶液 A 工作液,確保固體樣品被溶液淹埋,如果是液體樣品則震蕩混勻。

6. 95℃保溫 10 分鐘。

7. 待冷卻到常溫后加入 10uL 溶液 B 并混勻得 DNA 釋放液。每個樣品得到的 DNA釋放液足夠進行 50-100 次 PCR。

二、白色念珠菌PCR試劑盒 設置 PCR 反應(40 uL 體系)

8. 在 N+2 個 PCR 管中加入下列成分,下面以樣品數為 1 舉例(注意:如果 次使用DNA 釋放劑,*每個樣品設置兩個模板用量的 PCR 反應,兩個反應的模板使用量差 10 倍,由此確定*用量,以后就用效果*的那個模板用量):

9. 輕柔混勻后上機,按下面參數進行 PCR。

10. 電泳檢測 PCR 產物。預期的 PCR 產物長度為 216bp。陽性對照必須有此條帶出

現,陰性對照必須無任何擴增,否則實驗無效。對沒有擴增產物的樣品,需要用通用引物(如真核生物專一 PCR 引物,需自備)測試是否有抑制劑或樣品是否濃度達到 PCR 的要求,如果通用引物也擴不出來,需要濃縮并再次純化 DNA 樣品,或者更換 DNA 提取方法,直到通用引物能夠擴增出預計大小的片段。