步：預先打開培養箱開關，設定溫度為20℃(要求培養箱的恒溫變化幅度為±1℃)。

第二步：加熱或冷卻樣品至實驗溫度（一般為20℃），溫度波動范圍在±2℃之內。

第三步：曝氣1小時或攪拌半小時使水樣的溶解氧達到飽和（在20℃左右環境下）。

第四步：每升水樣添加1mL B1試劑、3mL B2試劑，如有需要可添加2mL硝化抑制劑。

第五步：根據量程用量筒準確量取經預處理PH在7.2左右的水樣。

第六步：將水樣通過漏斗轉入培養瓶中。

第七步：將清潔的攪拌轉子裝入培養瓶中。

第八步：將清潔的密封杯裝入培養瓶內。（為保證密封可以在密封杯上下兩側涂適量真空硅脂）。

第九步：通過漏斗向密封杯內裝入3/4勺（約0.6g）CO2吸收劑。

第十步：擰緊與培養瓶編號對應的瓶蓋，將培養瓶按順序放在測定儀主機上。

第十一步：將測定儀主機小心緩慢移入培養箱內，將電源線連接，并打開開關進行參數設置。

第十二步：實驗完成后應將培養瓶、密封杯及攪拌轉子*清洗干凈，待用。

注意：

⒈預先估計被測樣品的BOD值，如無法估計，可借助化學需氧量（CODCr）推算。一般BOD量按化學需氧量（CODCr）的70%計算大致的濃度范圍。根據水樣個數及8個培養瓶，選擇需準備平行樣數量。水樣須經過預處理其PH值應在7.2左右。

⒉如果發生CO2吸收劑進入樣品的情況，應倒掉樣品并重新準備新樣品。注意每個瓶子和密封蓋及管道是配套的，不能互換擰錯瓶蓋，否則數據將與瓶中水樣不對應。

⒊培養瓶中轉子如有轉動不好的，輕輕搖晃瓶子使其轉動即可，但切勿搖晃幅度過大使CO2吸收劑進入水樣。

4.在正常測定時恒溫等待時間不能低于1小時，也不能高于3小時，否則影響測量結果。環境溫度接近20℃選擇恒溫1小時，與20℃溫差較大時在范圍內適當延長恒溫等待時間。

5.數據處理，儀器根據設定的取樣量可以直讀濃度。用戶只需將同一樣品的平行樣取平均值即為此水樣的BOD值。

6.清洗培養瓶、密封杯及轉子時選用機械方法去除污垢，有條件的可選用超聲波清洗機清洗。