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實驗室的試劑貯存要求
貯存試劑和用于標本制備的材料應直接運送至試劑貯存和準備區(qū),不能經(jīng)過產物分析區(qū)。在打開含有反應混合液的離心管或試管前,應將其快速離心數(shù)秒。試劑原材料必須貯存在本區(qū)內,并在本區(qū)內制備成所需的貯存試劑。當貯存試劑溶液經(jīng)檢查可用后,應將其分裝貯存?zhèn)溆茫苊庥捎诮?jīng)常打開反應管吸液而造成污染。
含反應混合液的離心管或試管在冰凍前都應快速離心數(shù)秒。大多數(shù)用于擴增的試劑都應冰凍貯存。為避免因單次反應取液而頻繁的凍融主貯存試劑,應分裝冰凍貯存試劑溶液。貯存試劑的分裝體積根據(jù)通常在實驗室內一次測定所需的擴增反應數(shù)來決定。
主反應混合液的組成成份尤其是聚合酶的適用性和穩(wěn)定性通過預試驗來檢查,評價結果必須有書面報告。對于'熱啟動'技術(在個高溫變性步驟后加入酶),聚合酶也可不包含在主反應混合液中。
在整個本區(qū)的實驗操作過程中,操作者必須戴手套,并經(jīng)常更換。此外,操作中使用一次性帽子也是一個有效地防止污染的措施。
嚴禁用嘴吸取液體,加樣器和吸頭等必須經(jīng)高壓處理。
工作結束后必須立即對工作區(qū)進行清潔。本工作區(qū)的實驗臺表面應可耐受諸如次氯酸鈉的化學物質的消毒清潔作用。實驗臺表面的紫外照射應方便有效。由于紫外照射的距離和能量對去污染的效果非常關鍵,因此可使用可移動紫外燈(254nm波長),在工作完成后調至實驗臺上60~90cm內照射。由于擴增產物僅幾百bp,對紫外線損傷不敏感,因此紫外照射擴增片段必須延長照射時間,是照射過夜。實驗室及其設備的使用必須有日常記錄。
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