新一代的300A硅膠填料分辨率、靈敏度和回收率

• *的選擇性可以幫助發(fā)現(xiàn)其它C18柱可能未分辨出的峰

• 低TFA濃度或甚至無TFA仍可得到對稱性良好的峰形

• 備有小口徑與毛細(xì)管口徑規(guī)格的色譜柱可用于液相質(zhì)譜分析

• 對蛋白質(zhì)的高回收率有利于放大制備

應(yīng)用：

1.*的選擇性

某牛胎蛋白（bovine fetuin）樣品，分子量約為36KDa的糖蛋白，經(jīng)解后用HPLC分析。在

對比柱1和2上，一些樣品組分會干擾肽的分離，表現(xiàn)為色譜“鼓包"上疊加峰。而Vydac MS柱*的

選擇性避免了這種分離問題。

2.分離度與峰對稱性

Vydac MS C4色譜柱為人生長因子（hGH）及其去酰胺降解物（desamido hGH）的分析提供了

好的分析效果。而對比柱顯示出其固定相對hGH過強(qiáng)的保留作用，分析效果不理想。

3.使用少甚至不使用TFA而仍然可得好的峰形

反相分析蛋白和肽的常規(guī)經(jīng)驗是使用酸性流動相如在流動相中添加TFA。TFA能夠掩蓋被測物的堿基，

減少混合模式的保留，從而改善峰形。TFA還能改變對于不同被測物的保留與選擇性，調(diào)節(jié)TFA濃度能

夠優(yōu)化分離效果。但是TFA能吸收紫外，因此在低紫外波長下會增加背景值。而且TFA對于電噴霧質(zhì)譜

特別不利，它會干擾電噴霧過程中的離子生成，即所謂的“淬滅"效應(yīng)，從而導(dǎo)致質(zhì)譜檢測的靈敏性

下降。

4.對疏水性蛋白質(zhì)的分析

跨膜蛋白（transmembrane proteins）是吸附在生物膜上的疏水性蛋白質(zhì)，特別難以分離，Vydac

MS色譜柱為這類生物分子提供了的選擇性與峰形。在這個例子里，一個疏水性的跨膜蛋白得以與

一個合成的豆蔻酰衍生物和其它細(xì)胞組分分離。

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