GE 疏水層析填料17-0973-04
Phenyl Sepharose 6 FAST FLOW(HIGH SUB)
包裝:5L
特性/應用:疏水性zui強,載量高,適合含芳香族(aromatic)配體的生物分子的預處理
疏水層析(HIC)的分離是基于蛋白質的疏水性氨基酸與基質的疏水性配基之間的可逆性相互作用。
蛋白質和多肽的疏水氨基酸大多埋藏在蛋白質分子結構的內部。然而,仍然有一些疏水性氨基酸會暴露在蛋白分子的表面與基質的疏水性配基進行相互作用。與反相層析相比,疏水作用層析基質上的配體濃度要低很多,洗脫條件也更加溫和,從而有助于保持生物分子的生物活性。HIC特別適合于純化經(jīng)過硫酸銨沉淀或高鹽洗脫后的樣品,高離子強度可以加強蛋白與填料配基之間的疏水相互作用。
高離子強度的緩沖液可以增強疏水相互作用,這使得HIC成為硫酸銨沉淀和離子交換層析的一個**的純化步驟。HIC非常適合于純化工藝中的捕獲或中純步驟。
HIC期間,樣品成分在高離子強度的緩沖液(典型的是1~2M的硫酸銨或者是3M的NaCl)中結合到填充柱上。高濃度的鹽,尤其是硫酸銨,可能會沉淀蛋白質。因此,需要檢測將要使用的結合條件下靶蛋白的溶解性。通常采用降低的鹽梯度對靶蛋白進行連續(xù)梯度或分布梯度洗脫。
Phenyl Sepharose 6 Fast Flow是一種完善、標準芳香疏水作用層析(HIC)填料,用于捕獲和中間純化,需要低至填料的疏水
性。