C1498細胞專用培養基
產品名稱:C1498細胞專用培養基
產品貨號:TCM-G785
培養體系:DMEM-H+10%FBS+1%P/S
產品規格:500mL / 200mL / 125mL
產品形態:液體
生物安全檢測:細菌、真菌、支原體檢測陰性
內毒素含量:<10 EU/mL
儲存條件:2-8℃,避光儲存
運輸條件:冰袋冷藏運輸
有效期:3 months
使用C1498細胞專用培養基進行C1498小鼠白血病細胞培養步驟:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入5mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加4-6mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入6cm皿中),培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
一、貼壁細胞傳代方法:
1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2min,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加5ml以上含10%血清的培養基終止消化。
3.輕輕吹打細胞,脫落后吸出,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補加培養液,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含5-6 ml培養液的新皿中或者瓶中。
二、懸浮細胞傳代方法:
方法1:收集細胞,1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄上清液,補加1-2ml培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或瓶中。
方法2:可選擇半數換液方式,棄半數培養基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養基新皿中或者瓶中。
1)細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。棄培養基后加入少量,細胞變圓脫落后,進行離心收集,1000RPM條件下離心8-10分鐘,去除上清,按凍存數量加入到凍存液中。
三、注意事項
(1) C1498細胞專用培養基含有血清和雙抗,如無特別需要不用額外再添加血清和雙抗,可以直接使用。
(2) 使用前請將產品提前置于室溫或37°C充分預熱。
(3) 使用產品時應注意無菌操作,避免污染。
(4) 使用產品時請做好個人防護。
(5) 為保持本產品的使用效果,不宜將其長時間放置于室溫或較高的溫度環境中。
(6) 所有產品請于保質期內使用,超出保質期,請放棄使用。
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