- QuickAntibody-Mouse5W-抗體制備佐劑-免疫佐劑
- QuickAntibody-Mouse5W用途
通過5周2針的標準免疫程序制備小鼠單克隆和多克隆抗體,ELISA滴度(Cutoff值為0.1000)可達到1:10000-1:。
QuickAntibody-Mouse5W 使用方法(詳見使用說明書)
1. 用生理鹽水將抗原稀釋到2倍終濃度(按每針次50μl用量配制)。
備注:推薦使用的抗原用量為
(1)免疫原性較強的滅活全 virus 或全細菌以及 virus 樣顆粒抗原每針次1-5μg;
(2)免疫原性較弱的亞單位蛋白抗原每針次5-20μg;
(3)偶聯了載體蛋白的小分子抗原每針次20-50μg。
2. 充分混勻佐劑,無菌條件下取出所需用量(按每針次50μl)與抗原按體積比1:1迅速混勻。
備注:本佐劑產生沉淀屬正常現象,與抗原混合操作越快越好。
3. 通過后腿小腿肌肉注射免疫小鼠( 視頻),每只小鼠注射100μl。
備注:本佐劑與抗原混合后產生沉淀屬正常現象,抽入針管前應充分混勻,抽入針管后應盡快注射。
4. 第21天按同樣方式加強免疫1針。
備注:每次佐劑和抗原現配現用。
5. 第35天采微量尾血進行ELISA測定,抗體滴度應在1:10000-1:范圍內,隨后即可采全血或按常規方法進行抗原沖擊免疫和脾細胞融合。
- 如何選擇 QuickAntibody 系列免疫佐劑?
- QuickAntibody系列免疫佐劑屬于一種新型免疫佐劑,分別用于制備小鼠單克隆和多克隆抗體(見下表)。
產品名稱 | 貨號 | 規格 | 免疫周期 | 特點 | 用途 | 預期滴度 |
QuickAntibody -Mouse5W | KX0210041 | 1ml | 5周 | 標準免疫 | 小鼠單抗 小鼠多抗 | 1:10000- 1: |
QuickAntibody -Mouse3W | KX0210042 | 1ml | 3周 | 快速免疫 | 小鼠單抗 小鼠多抗 | 1:10000- 1:100000 |
QuickAntibody -Mouse2W | KX0210043 | 1ml | 2周 | 快速免疫 | 小鼠多抗 | 1:1000- 1:10000 |
QuickAntibody -Rabbit8W | KX0210045 | 1ml | 8周 | 標準免疫 | 兔多抗 | 1:10000- 1:1000000 |
- QuickAntibody系列免疫佐劑有哪些特點?
與常規使用的弗氏佐劑相比,QuickAntibody免疫佐劑具有免疫周期短、針次少、無需乳化、抗原用量低、抗體滴度高、抗體親合力高、易獲得構象型表位的抗體等多方面特點,詳述如下:
1. QuickAntibody只需兩針免疫,無論是用于單克隆還是多克隆抗體制備,與弗氏佐劑相比可減少免疫針次。
- 2. QuickAntibody通過減少免疫針次和降低每針次抗原用量,從而可大大節省總抗原用量。
- 推薦使用的抗原用量為(1)免疫原性較弱的亞單位蛋白抗原每針次5-50μg(通常為小鼠5-20μg,兔子20-50μg);
- (2)免疫原性較強的滅活全病毒或全細菌以及病毒樣顆粒抗原每針次1-10μg(通常為小鼠1-5μg ,兔子5-10μg)。
3. QuickAntibody抗體產生快,抗體滴度高,抗體親合力高。以標準免疫程序為例,無論是用于單克隆還是多克隆抗體制備,只需要在三周內進行兩針免疫,通常在第五周即可獲得ELISA滴度(Cutoff值為0.1000)高達1:10000-1:的高親合力抗體水平。
4. QuickAntibody不破壞抗原天然構象,從而易于篩選獲得針對構象型抗原表位的單克隆抗體,這是弗氏佐劑所不具備的一個重要特點。
5. QuickAntibody是水溶性佐劑,使用時不需要弗氏佐劑的復雜乳化過程,抗原和佐劑只需簡單混合即可免疫動物。
6. QuickAntibody使用肌肉免疫途徑,與常規小鼠單克隆抗體制備過程中使用足墊或脾內免疫相比,極大方便了使用。
- 7. QuickAntibody的一個重要用途是可方便地用于制備小鼠多克隆抗體。常規多克隆抗體制備多使用兔子,不但免疫針次多、抗原用量大和抗體產生慢,而且由于技術要求較高而往往需要委托第三方單位制備。
- 使用QuickAntibody免疫佐劑,任何實驗動物人員均可方便快速地制備小鼠多克隆抗體,標準免疫程序只需要簡單地免疫5只小鼠,即可在五周后獲得1ml高質量的小鼠多克隆抗體。(推薦使用本佐劑制備小鼠多克隆抗體,1ml高質量的小鼠多克隆抗體足以滿足絕大多數用戶的實驗需求,包括用于酶聯免疫、免疫印跡、流式細胞、免疫組化和免疫沉淀等)。
- 8. QuickAntibody建議常溫運輸,2~8oC保存,無菌取用,有效期18個月。
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