碧云天生產(chǎn)的Western螢光檢測(cè)試劑BeyoECL Plus是一種超敏ECL化學(xué)發(fā)光試劑盒，本產(chǎn)品與二抗上偶聯(lián)的辣根過(guò)氧化物酶發(fā)生化學(xué)反應(yīng)，發(fā)出螢光，從而可以通過(guò)用X光片壓片或其它適當(dāng)化學(xué)發(fā)光成像設(shè)備檢測(cè)樣品。
碧云天生產(chǎn)的Western螢光檢測(cè)試劑目前共有三種，分別是P0018S /P0018M BeyoECL Plus、 P0018AS/P0018AM BeyoECL Star 和 P0018FS/ P0018FM BeyoECL Moon。常規(guī)的Western檢測(cè)，可以使用BeyoECL Star。對(duì)于豐度比較高的目的蛋白的檢測(cè)，例如內(nèi)參蛋白等的檢測(cè)，使用性價(jià)比更高的BeyoECL Plus。

  對(duì)于低豐度較難檢測(cè)的目的蛋白，可使用檢測(cè)靈敏度高的BeyoECL Moon。但對(duì)于豐度適中的目的蛋白的檢測(cè)，不太建議使用BeyoECL Moon，因?yàn)槭褂肂eyoECL Moon時(shí)由于檢測(cè)靈敏度高，容易產(chǎn)生過(guò)曝的現(xiàn)象。
BeyoECL Plus靈敏度高，比DAB顯色的靈敏度至少高200倍，比Amersham公司的ECL或碧云天以前生產(chǎn)的BeyoECL的靈敏度高20-50倍左右，比Pierce公司的SuperSignal West Pico Substrate的靈敏度高3-100倍。
BeyoECL Plus的發(fā)光時(shí)間更長(zhǎng)。在100微升1微克/毫升辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記IgG中，加入100微升碧云天的BeyoECL Plus工作液或Pierce公司的SuperSignal West Pico Substrate工作液進(jìn)行檢測(cè)。在暗房中，兩者均可發(fā)出肉眼可見(jiàn)的藍(lán)色螢光，但加入BeyoECL工作液的試管內(nèi)的亮度要高很多。剛開(kāi)始數(shù)分鐘內(nèi)加入BeyoECL Plus工作液的試管發(fā)光強(qiáng)度是加入SuperSignal West Pico Substrate工作液的試管的3倍。約30分鐘后，加入BeyoECL Plus工作液的試管仍然可以發(fā)出肉眼可見(jiàn)的較強(qiáng)的藍(lán)色螢光，而加入Pierce公司的SuperSignal West Pico Substrate工作液的試管發(fā)出的螢光已經(jīng)很難用肉眼進(jìn)行分辨，定量結(jié)果顯示此時(shí)加入BeyoECL Plus工作液的試管發(fā)光強(qiáng)度是加入SuperSignal West Pico Substrate工作液的試管的100倍以上(參考圖1)。

圖1. BeyoECL Plus和Pierce公司SuperSignal West Pico效果比較圖。詳細(xì)的比較方法如上所述。

BeyoECL Plus的高靈敏度可以大大節(jié)省寶貴的樣品以及非常昂貴的一抗和二抗的用量。同時(shí)必須注意適當(dāng)減少一抗和二抗或樣品的用量，以免獲得過(guò)深的難以比較灰度的條帶。
BeyoECL Plus和BeyoECL Star的檢測(cè)效果對(duì)比圖參考圖2。

圖2. BeyoECL Plus和BeyoECL Star的檢測(cè)效果對(duì)比圖。Western檢測(cè)過(guò)程中僅發(fā)光試劑不同，其余相同。

BeyoECL Plus采用了全新配方，更加穩(wěn)定。BeyoECL Plus的兩種試劑37℃水浴孵育30天，和4℃保存的試劑相比，對(duì)相同樣品的檢測(cè)效果無(wú)差異。
BeyoECL Plus的背景較低，對(duì)PVDF膜和硝酸纖維素膜均適用。PVDF膜( FFP36 / FFP39)和 NC膜(FFN03)找蘇州阿爾法生物訂購(gòu)。
包裝清單：

保存條件：
4 ℃避光保存，一年有效。37 ℃避光保存，一個(gè)月有效。如果長(zhǎng)期不用，可以-20 ℃避光保存。-20 ℃可以保存更長(zhǎng)時(shí)間。

注意事項(xiàng)：
BeyoECL Plus A液和B液在吸取過(guò)程中必須要更換槍頭，A液和B液相互污染后會(huì)導(dǎo)致A液或B液逐漸失效，影響后續(xù)的使用效果。
各溶液使用后，請(qǐng)蓋緊瓶蓋，以防失效。特別是B液，含有氧化劑，比較容易被還原而失效。
BeyoECL Plus的螢光持續(xù)時(shí)間很長(zhǎng)，但開(kāi)始反應(yīng)后的30分鐘內(nèi)螢光更強(qiáng)一些，隨后螢光會(huì)逐漸減弱，因此請(qǐng)注意充分利用這螢光較強(qiáng)的30分鐘進(jìn)行壓片。
在BeyoECL Plus的檢測(cè)靈敏度仍不足以滿足實(shí)驗(yàn)需要時(shí)，請(qǐng)選擇檢測(cè)靈敏度高的 BeyoECL Star (P0018AS / M)或 BeyoECL Moon (P0018FS/ M)。
BeyoECL Plus A液和B液均對(duì)人體有害，操作時(shí)請(qǐng)小心，并注意有效防護(hù)以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。