(Trypsin-EDTA 0.25%)(含酚紅)
貨號 規格 備注
BDXB0020-1 100ml 1×
保存溫度:-20℃
(Trypsin-EDTA)是常用的細胞分離試劑,為223個氨基酸組成的單鏈多肽,是原(Trypsinogen)在Lys6和Ile7之間切除氨基N末端6肽(Hexapeptide)得到的。屬于水解酶家族,活化位點包括His46和Ser183,裂解Lysine的羧基末端和 Arginine的氨基末端,水解效率在任何一端存在酸性氨基酸時降低,而當Proline存在于裂解 位點的羧基末端一側時,水解反應不能發生。的使用pH值為7.2-9.2。
成分 貨號 BDXB0020-1 0.25% EDTA·4Na 0.02g/L 酚紅 N/A
操作步驟
注:使用前將解凍,保存在4℃,建議不要反復凍融。
1. 移除細胞培養瓶/皿中的培養液,用適量不含鈣和鎂離子的PBS或D-PBS快速沖洗細胞 1-2次,移除培養瓶/皿中的液體;
2. 加入適量(10cm培養皿加入0.5ml),轉動培養瓶/皿,讓細胞和充分接觸;
3. 置于37℃培養箱中,孵育1-5min(不同細胞類型有所不同);
4. 輕輕磕擊培養瓶/皿,在倒置顯微鏡下觀察,大多數細胞熒光橙懸浮狀態;
5. 加入培養基,用移液管吹打5-10次,按照實驗要求將細胞種植到新的培養瓶/皿中。
注意事項
1. 對細胞有損傷,應盡量縮短孵育時間;
2. 如果細胞培養在不含血清的培養基中,消化完畢,加入PBS,500×g離心10分鐘, 移除PBS,將細胞重懸于所用的培養基中。
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