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產品概述

Cell Navigator 活細胞微管蛋白染色試劑盒是美國AAT Bioquest生產的用于標記活細胞的試劑盒，該試劑盒提供了一種可靠的方法，可以用Tubulite Red對活細胞中的微管蛋白進行熒光成像。該探針可透過活細胞，因此不需要固定細胞即可對微管蛋白進行成像。它可以方便地用于跟蹤活細胞中微管蛋白的聚合過程。它的紅色光譜波長和良好的細胞滲透性使該探針易于與其他顏色（如GFP表達的細胞）或核染料（如DAPI）一起使用。中性的Tubulite Red容易穿過活細胞的質膜。親脂性封閉基團一旦進入細胞，就會被酯酶裂解，形成帶負電荷的產物，并充分保留在細胞內部。百螢生物是AAT Bioquest的中國代理商，為您提供優質的Cell Navigator 活細胞微管蛋白染色試劑盒。

適用儀器

熒光顯微鏡
激發：	Cy5濾波片組
發射：	Cy5濾波片組
推薦孔板：	黑色透明

實驗方案

樣品實驗方案

簡要概述

1.用5×105至1×106細胞/ mL的密度制備含測試化合物的細胞
2.準備Tubulite Red工作溶液并將其添加到細胞中
3.在37℃下孵育30至60分鐘
4.使用Cy5濾波片組讀取熒光強度

溶液配制

1.儲備溶液配制

所有未使用的儲備溶液應分為一次性使用的等分試樣，并在制備后儲存在-20°C下。避免重復凍融循環。
Tubulite Red儲備液（500X）：
將25 µL（Cat＃23170）或75 µL（Cat＃23171）DMSO（組分D）添加到Tubulite Red（組分A）小瓶中，并充分混合。注意：分裝并在-20℃下存儲未使用的Tubulite Red儲備液。避免重復冷凍/融化循環。

2.工作溶液配制

Tubulite Red工作溶液（1X）：
將2.5 µL Tubulite Red儲備液儲備溶液和100 µL 25 mM ReadiUse Probenecid（組分D）加入1 mL的測定緩沖液（組分B）或您選擇的緩沖液中，并充分混合。注意：請保證Tubulite Red工作溶液新鮮。工作溶液可以穩定幾個小時。

點擊查看細胞制備方案

樣品示例及操作

1.根據需要準備細胞樣品。

2.除去細胞生長培養基，并用PBS（未提供）或您選擇的任何其他緩沖液洗滌細胞。（可選的）。

3.加入100 µL Tubulite Red工作溶液，并在37oC培養箱中孵育30至60分鐘。注意：適當的孵育時間取決于所用的單個細胞類型和細胞濃度。優化每個實驗的孵育時間。

4.除去工作溶液，并用PBS或您選擇的其他任何緩沖液（2.5毫安的Probenecid（從組分C稀釋））洗滌細胞兩次。

5.用含2.5 mMProbenecid的測定緩沖液（從組分C稀釋）覆蓋細胞，并使用Cy5濾光片組在熒光顯微鏡下監控熒光強度。

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