產(chǎn)品介紹

RatioWorks BCFL,酸*BCECF代替品 染料是美國AAT Bioquest生產(chǎn)的BCFL染料，細胞內(nèi)pH在許多細胞事件中起著重要的調(diào)節(jié)作用，包括細胞生長，鈣調(diào)節(jié)，酶活性，受體介導(dǎo)的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)，離子轉(zhuǎn)運，內(nèi)吞作用，趨化作用，細胞粘附和其他細胞過程。近年來，pH敏感的熒光染料已廣泛應(yīng)用于監(jiān)測細胞內(nèi)pH的變化。使用熒光pH指示劑的成像技術(shù)還使研究人員能夠以更大的空間分辨率和采樣密度研究這些過程，這可以使用其他技術(shù)（例如微電極）來實現(xiàn)。其中，2'，7'-雙-（2-羧乙基）-5-（和-6）-羧基熒光素（BCECF）是的pH探針，因為它可用于按比例監(jiān)測細胞的pH。然而，所有商用BCECF AM是至少三種異構(gòu)體的復(fù)雜混合物，批次之間的比率不同，這使BCECF應(yīng)用變得復(fù)雜。開發(fā)BCFL是為了克服與BCECF AM相關(guān)的異構(gòu)體難題。作為BCECF，BCFL表現(xiàn)出pH依賴性的雙重激發(fā)，與BCECF基本相同。它的pKa約為7.0，也與BCECF相同。與BCECF一樣，BCFL的雙激發(fā)光譜在454 nm處具有等吸收點，應(yīng)使BCFL成為良好的激發(fā)比pH指示劑。BCFL比例成像使細胞內(nèi)pH值測定基本上獨立于幾個可變因素，包括染料濃度，光程長度，細胞滲漏和光漂白速率。BCFL，AM是單一異構(gòu)體，因此pH值的測量比BCECF，AM更可重復(fù)，由許多不同的異構(gòu)體組成 該BCFL是BCFL AM的酯酶水解產(chǎn)物，可與BCFL AM一起用作參考標準。百螢生物是AAT Bioquest的中國代理商，為您提供的RatioWorks BCFL,酸*BCECF代替品 染料。

操作方法

1.用pH 3到10（3、4、5、6、7、7.5、8、10）制備一系列50 mM磷酸鹽緩沖液

2.制成1 mM DMSO儲備溶液。如果在-20°C下儲存，則DMSO儲備液可保存6個月。

3.制作 1：將1000稀釋液放入不同的pH緩沖液中以得到1uM。

4.在Ex / Em = 500/535和430/535 nm下測量熒光比。