Amplite 比色法腸激酶活性檢測試劑盒是美國AAT Bioquest生產的用于酶活性的試劑盒，腸激酶（也稱為腸肽酶）是由十二指腸壁中的細胞產生的絲*酸蛋白酶，并且是人和動物消化系統中的關鍵酶。 腸激酶將胰*白酶原轉化為其活性形式的胰*白酶，導致隨后的胰腺消化酶的活化。 腸激酶的缺乏導致腸道消化障礙。 腸激酶的抑制可能通過抑制參與癌變和轉移的蛋白酶而具有抗腫瘤作用。 因此，高度選擇性和靈敏的腸激酶檢測在生物化學應用中起著關鍵作用。 Amplite 比色腸激酶活性檢測試劑盒為定量腸激酶活性提供了一種靈敏的檢測方法。 在腸激酶切割后，腸激酶底物可以通過EK Yellow 在吸光度酶標儀中在405nm處檢測。百螢生物是AAT Bioquest的中國代理商，為您提供優質的Amplite 比色法腸激酶活性檢測試劑盒。

適用儀器

樣品實驗方案

簡要概述

1.用稀釋的腸激酶標準品（50μL）制備測試樣品
2.加入等體積的腸激酶工作液（50μL）
3.在37°C孵育30-60分鐘
4.監測OD增加到405nm

溶液制備

1.儲備溶液

所有未使用的儲備溶液應分成一次性等分試樣，并在制備后儲存在-20°C。 避免反復凍融循環。
1. EK Yellow 原液（100X）：
將50μLDMSO（組分E）加入EK Yellow （組分A）中以制備100X儲備溶液。

2.腸激酶底物儲備液（100X）：
將50μLDMSO（組分E）加入腸激酶底物（組分B）中以制備100X儲備溶液。

3.腸激酶標準溶液（10ug / mL）：
將50uL ddH2O + 0.1％BSA加入腸激酶標準小瓶（組分D）中以制備10μg/ mL腸激酶原液。

2.標準溶液

腸激酶標準
將10μL10μg/ mL腸激酶標準溶液加入990μL分析緩沖液（組分C）中，得到100ng / mL腸激酶溶液（EK7）。 然后在測定緩沖液中進行1：2連續稀釋，以獲得連續稀釋的腸激酶標準品（EK6-EK1）。 注意：EK標準僅用于陽性對照，不應作為酶活性的定量標準。

3.工作溶液

將50μLEKYellow 儲備液和50μL腸激酶底物儲備液加入5 mL分析緩沖液（組分C）中; 混合均勻，制成腸激酶（EK）工作溶液（組分A + B + C）。 注意：對于一個96孔板，測定混合物就足夠了。 配制的工作溶液不穩定，需快速使用。