張經理
當前位置:西安百螢生物科技有限公司>>trFluor™ 染料和試劑盒>>檢測試劑盒>> 11308Amplite 比色超氧化物歧化酶檢測試劑盒
Amplite 比色超氧化物歧化酶檢測試劑盒是美國AAT Bioquest生產的用于檢測超氧化物歧化酶的試劑盒,超氧化物歧化酶(SOD)是一類催化超氧化物歧化成氧和過氧化氫的酶。超氧化物是細胞中主要的活性氧物質之一。它與神經退行性疾病,缺血再灌注損傷,動脈粥樣硬化和衰老相關。 SOD是幾乎所有暴露于超氧自由基的細胞的重要抗氧化防御劑。事實上,缺乏SOD1的小鼠會發展出多種病理,包括肝細胞癌,加速年齡相關的肌肉質量減少,早期白內障發病率和壽命縮短。 SOD的過表達保護小鼠纖維肉瘤細胞免于凋亡并促進細胞分化。 Amplite 比色超氧化物歧化酶(SOD)檢測試劑盒為測量SOD活性提供了一種快速而靈敏的方法。,NADH和SOD酶系統產生超氧自由基,將WST-1還原成藍色甲dye染料,其在440nm附近具有吸收。 SOD通過催化超氧陰離子歧化成過氧化氫和分子氧來抑制WST-1的還原,從而降低了甲product產物的440nm吸收。 440nm吸收的減少與SOD活性成比例。該試劑盒可以方便的96孔或384孔微量滴定板形式進行。百螢生物是AAT Bioquest的中國代理商,為您提供的Amplite 比色超氧化物歧化酶檢測試劑盒。
樣品實驗方案
簡要概述
1.準備并添加SOD標準品或測試樣品(50μL)
2.添加SOD工作溶液1(25μL)
3.添加SOD工作溶液2(25μL)
4.在室溫下孵育30-60分鐘
5.監測440nm處的吸光度
溶液配制
1.儲備溶液配制
所有未使用的儲備溶液應分成一次性等分試樣,并在制備后儲存在-20°C。 避免反復凍融循環。
1.1SOD標準溶液(10 kU / mL):
將50μL測定緩沖液(組分E)加入到SOD標準品(組分D)的小瓶中以制備10kU / mL標準溶液。
2.標準溶液配制
將10μL10kU / mL SOD標準溶液加入990μL分析緩沖液(組分E)中,得到100 U / mL SOD標準溶液(SD1)。 取100 U / mL SOD標準溶液(SD1),在分析緩沖液(組分E)中進行1:10,得到10U / mL SOD標準溶液(SD2)。 取10 U / mL標準溶液(SD2)并進行1:3連續稀釋,以獲得使用分析緩沖液(組分E)的連續稀釋的SOD標準品(SD3-SD7)。
3.工作溶液配制
3.1 SOD工作溶液方案1:
將2.5mL測定緩沖液(組分E)加入WST-1瓶(組分A)中并充分混合。 然后將50μL50XSOD酶溶液(組分B)加入該瓶中以制備SOD工作溶液1.注意:該SOD工作溶液1應在實驗前制備,并避光。 SOD工作溶液1不穩定,應丟棄未使用的部分。
3.2 SOD工作溶液方案2:
將50μL測定緩沖液(組分E)加入到NADH小瓶(組分C)中并充分混合。 然后,將50μL的NADH儲備溶液轉移到2.5mL測定緩沖液(組分E)中以制備SOD工作溶液2。
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