張經理
當前位置:西安百螢生物科技有限公司>>磷酸酶>> 11952Amplite 熒光法堿性磷s酶檢測試劑盒
Amplite 熒光法堿性磷s酶檢測試劑盒是美國AAT Bioquest生產的用于磷酸酶的試劑盒,堿性磷酸酶是廣泛分布于人體各臟器器官中,其中以肝臟為多其次為腎臟,骨骼、腸、和胎盤等組織,。這種酶能催化核酸分子脫掉5’磷酸基團,從而使DNA 或RN段的5’-P末端轉換成5’-OH末端,并生成一分子的有機基團和一分子的無機磷酸。堿性磷酸酶不是單一的酶,而是一組同功酶。堿性磷酸酶在ELISA、免疫組化,Northern, Southern 和 Western blot分析中有很高的靈敏度。它廣泛地用于多種生物學分析(特別是免疫分析)和基于ELISA的疾病診斷。用MUP,一種堿性磷酸酶的藍色熒光底物來定量檢測溶液中、細胞抽提液,固相物質表面(例如PVDF膜)的堿性磷酸酶活性。本試劑盒提供所有必須成分,包括我們的產品組合和分析方法,并且與可用于HTS(高通量篩選)。百螢生物是AAT Bioquest的中國代理商,為您提供的Amplite 熒光法堿性磷s酶檢測試劑盒。
樣品實驗方案
簡要概述
1.準備堿性磷酸酶工作溶液(50μL)
2.添加堿性磷酸酶標準品和/或測試樣品(50μL)
3.在室溫或37°C孵育10 - 30分鐘
4.監測Ex / Em = 360/450 nm處的熒光強度(截止= 435 nm)
溶液制備
1.儲備溶液
所有未使用的儲備溶液應分成一次性等分試樣,并在制備后儲存在-20°C。 避免反復凍融循環。
1.1 MUP Plus 原液(250X):
將100μL無菌H2O加入到MUP Plus (組分A)的小瓶中,制成250X MUP Plus 原液。 應立即使用MUP Plus 原液。
1.2 堿性磷酸酶標準溶液(100 mU / mL):
加入100μL含0.1%BSA(H2O-0.1%BSA)的蒸餾水至堿性磷酸酶標準品(組分C,10單位),得到100單位/ mL堿性磷酸酶標準溶液。
2.標準溶液
堿性磷酸酶標準
將10μL100單位/ mL堿性磷酸酶標準溶液加入990μLH2O-0.1%BSA中,生成1,000 mU / mL堿性磷酸酶標準溶液。 取1,000 mU / mL標準溶液,在H2O-0.1%BSA中進行1:10,得到100 mU / mL標準溶液(AS7)。 然后取100 mU / mL標準溶液(AS7),在H2O-0.1%BSA中進行1:3連續稀釋,得到連續稀釋的堿性磷酸酶標準品(AS6-AS1)。 注意:應丟棄未使用部分稀釋的堿性磷酸酶標準溶液。
3.工作溶液
將20μL250XMUP Plus 儲備溶液加入5 mL分析緩沖液(組分B)中,制成堿性磷酸酶工作溶液。 注意:避光。 為每個實驗準備新鮮的堿性磷酸酶工作溶液。
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