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四極桿液質用 Trap-Free 2維LCMS系統

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更新時間:2021-06-29 18:48:47瀏覽次數:331次

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Question:使用LCMS測定以不揮發性流動相條件測出的雜質時,是否還需要重新探討揮發性流動相條件?Solution:不需要

http://www.an.shimadzu.co.jp/lcms/c6nq2v000003dl54-img/c6nq2v000003dlnd.jpg

Question:
使用LCMS測定以不揮發性流動相條件測出的雜質時,是否還需要重新探討揮發性流動相條件?

Solution :

不需要。如果使用Trap-free 2維LC/MS系統則可在線變更流動相。

可在線實現不揮發性流動相和揮發性流動相之間的切換。
與Labsolutions聯合使用,是非常便利的支持工具。
只須將目標雜質導入MS,而無需擔心峰遺失。

Trap-Free 2維LC/MS雜質鑒定系統的分析流程

 使用支持工具創建時間程序和批處理表

只需輸入在一維UV色譜圖上的雜質峰的保留時間,就可編制的閥切換。同時創建用于獲取多個雜質與各空白數據的批處理表。

使用支持工具制作時間程序與批處理表

 有力支持雜質解析的軟件

利用作為LabSolutions附屬功能的數據瀏覽器,比較樣品與空白的數據,可方便地確認雜質的質譜圖。      

數據瀏覽器上顯示樣品與空白數據的實例

注意事項
1.本系統由LC單元、質譜儀、及啟動套件構成。
2.啟動套件包括專用軟件和一套必要的配管部件。

基于Trap-Free 2維LC/MS雜質鑒定系統的藥物雜質分析

為了提高藥物的安全性,需要解析藥物中所含雜質有無遺傳毒性等嚴重毒性,這就要求進行結構解析。LC/MS可有效應用于微量雜質的結構解析,但HPLC分析雜質時,經常以210nm等短波長檢測,因此,流動相多使用磷酸緩沖液。此時,不能以此流動相將未知雜質導入LC/MS。有時即便緩沖液的pH一致,但因一些雜質的分離狀態發生變化,而難以使用LC/MS進行未知雜質的解析。

圖1為*鈣的雜質分析,是將流動相緩沖液從日本藥典收錄的檸檬酸緩沖液 pH5.0(為不揮發性鹽,不能導入LC/MS)變更為同一pH的醋酸緩沖液,將有機溶劑從四氫呋喃/ 乙腈(1/1)混合液變為乙腈時的色譜圖??芍鞒煞值南疵摃r間雖然沒有大的差異,但雜質的洗脫模式發生了較大變化。因此,為了解析雜質的結構解析,需要以HPLC分析條件下的流動相,將目的雜質導入LC/MS。

在此介紹應用“Trap-free 2維LC/MS雜質鑒定系統"(圖2)進行上述雜質結構解析的實例。

圖1  *鈣の雜質分析例

在此系統的1維中,以通常的HPLC分析條件進行分離,將需要進行結構解析的雜質峰的峰頂附近導入捕集環路。此環路對于2維的分離起到進樣器的作用。2維起到分離1維的流動相成分和目的雜質,以及導入至LC/MS的作用。

因此, 2維的分離條件幾乎不進行單獨探討,使用一般的基于0.1%甲酸/ 乙腈的梯度洗脫導入MS部分。為了進行結構解析,MS使用可實施MSn、獲得的精密質量數的LCMS-IT-TOF。

圖2 Trap-free2維LC/MS雜質鑒定系統配置
[1維(紅色流路)在通常的分析條件下使用]

圖3表示按日本藥典收錄的分離條件檢測的雜質a(含約0.2%,參照圖1)的2維的色譜圖。沒有進行捕集濃縮,將峰頂附近導入2維,去除了來自1維流動相的影響,可將目的雜質導入MS。圖4表示對此雜質獲得的MS譜圖。

可同時進行正負離子測定,可測定質量數信息。

圖3 雜質a的2維色譜圖

圖4 雜質a的MS譜圖

雜質a的m/z 718的MS/MS譜圖結果如圖5所示。將本譜圖與主成分*的MS/MS譜圖進行比較,推測雜質a的結構為圖6。并且,對于更微量的雜質b(約0.01%,參照圖1),如圖7所示,能夠以出色的S/N比獲得正、負極性的質譜圖。

圖5 雜質a的MS/MS譜圖

圖6 雜質a的推測結構

圖7 雜質b的MS譜圖

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