實時熒光定量PCR（RealTime PCR）技術服務

實時熒光定量PCR（RealTime PCR）技術服務

     實時熒光定量PCR技術即是在PCR反應體系中加入熒光基團，利用熒光信號實時監(jiān)測整個PCR進程，zui后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR避免了傳統(tǒng)PCR以終產(chǎn)物檢測定量產(chǎn)生的偏差，提高實驗的重復性。該技術已被廣泛用于檢測細胞mRNA表達量的變化；比較不同組織的 mRNA表達差異；驗證基因芯片，siRNA干擾的實驗結果等。

SYBR Green熒光染料法

SYBR Green是一種DNA結合染料，能非特異地摻入到雙鏈DNA中去。在游離狀態(tài)下，它不發(fā)出熒光，但一旦結合到雙鏈DNA中以后，便可以發(fā)出熒光。它的zui大優(yōu)點就是可以與任意引物、模板相配合，用于任意反應體系中。從經(jīng)濟角度考慮，它也比其它的探針的價格要便宜得多。但由于它能與所有的雙鏈DNA結合，所以一旦反應體系中出現(xiàn)非特異擴增，那它就會影響到定量結果的可靠性與重復性。要避免這種不利因素，可以通過選擇良好的引物并優(yōu)化反應條件以消除非特異性影響。

TaqMan熒光探針法
　　PCR擴增時在加入一對引物的同時加入一個特異性的熒光探針，該探針為一寡核苷酸，兩端分別標記一個報告熒光基團和一個淬滅熒光基團。探針完整時，報告基團發(fā)射的熒光信號被淬滅基團吸收；PCR擴增時，Taq酶的5-3外切酶活性將探針酶切降解，使報告熒光基團和淬滅熒光基團分離，從而熒光監(jiān)測系統(tǒng)可接收到熒光信號，即每擴增一條DNA鏈，就有一個熒光分子形成，實現(xiàn)了熒光信號的累積與PCR產(chǎn)物形成*同步。

上海研吉代做實驗項目：
一、分子生物學檢測服務
1、 引物設計合成（人、大鼠、小鼠、兔等）
2、 基因表達水平檢測、內(nèi)參檢測
3、 SNP檢測服務
4、 甲基化檢測服務
5、 測序技術服務
6、 芯片檢測（全基因、MicroRNA）
7、 染色體分析

二、病理形態(tài)學檢測
1、 HE、特殊染色（PAS、MASSON等）
2、 電鏡（透射、掃描、免疫透射等）
3、 免疫組化（陽性表達部位、陽性面積、陽性細胞計數(shù)、微血管密度、
淋巴管密度、光密度等）
4、 TUNEL研究細胞凋亡，常規(guī)病理細胞形態(tài)分析
5、 組織芯片
6、 原位雜交（DNA、RNA、MicroRNA等）

三、蛋白質(zhì)技術服務
1、 免疫印跡（Western-blotting）分析
2、 蛋白質(zhì)組學
3、 凝膠遷滯實驗（EMSA）分析DNA或RNA結合蛋白

四、免疫學檢測服務
1、 酶聯(lián)免疫（ELISA）技術
2、 放射免疫（RIA）
3、 化學發(fā)光
4、 常規(guī)生化檢測

五、代謝組學
1、 GC-MS、LC-MS、NMR