目錄:上海帛科生物技術(shù)有限公司>>基因檢測PCR試劑盒>>熒光定量PCR>> 50次亞洲柑桔黃龍病菌PCR試劑盒
產(chǎn)品特點(diǎn):
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應(yīng),無非特異性擴(kuò)增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達(dá)10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
產(chǎn)品名稱:亞洲柑桔黃龍病菌PCR試劑盒
產(chǎn)品規(guī)格: 50次
產(chǎn)品貨號:BK-P96883
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。
原理是由一對引物介導(dǎo),能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴(kuò)增,經(jīng)過n個(gè)熱循環(huán)擴(kuò)增,擴(kuò)增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴(kuò)增效率=倍,使得檢測擴(kuò)增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。產(chǎn)品僅用于科研
特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
產(chǎn)品特點(diǎn):
1. 使用化學(xué)修飾的熱啟動聚合酶,反應(yīng)特異性高,*程度地避免了非特異擴(kuò)增;
2. 反應(yīng)緩沖液經(jīng)充分優(yōu)化,反應(yīng)靈敏快速,40個(gè)循環(huán)只需20多分鐘;
3. 抗干擾能力強(qiáng),反應(yīng)重復(fù)性高,適合對土壤、糞便、腫瘤和血液來源的復(fù)雜樣本中的靶基因進(jìn)行檢測分析。
在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程,zui后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。
特異性熒光標(biāo)記:
TaqMan法
TaqMan探針的特性:
(1)5′端標(biāo)記有報(bào)告基團(tuán)(Reporter, R),如FAM、VIC等
(2)3′端標(biāo)記有熒光淬滅基團(tuán) (Quencher, Q)
(3)探針完整,R所發(fā)射的熒光能量被Q基團(tuán)吸收 ,無熒光, R與Q分開,發(fā)熒光
(4)Taq酶有 5′→3′外切核酸酶活性,可水解探針
相對定量通過內(nèi)標(biāo)定量:
內(nèi)標(biāo)(Endogenous Control)通常是β-actin、GAPDH基因等看家基因,在細(xì)胞中的表達(dá)量或在基因組中的拷貝數(shù)恒定,受環(huán)境因素影響小,內(nèi)標(biāo)定量結(jié)果代表了樣本中所含細(xì)胞或基因組數(shù)量。
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程,最后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括絕對定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的絕對定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
①取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝螅?/span>4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí),先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。
錄甲基樹脂25克RT 大鼠單核細(xì)胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)ELISA檢測試劑盒Ratmonocytechemotacticprotein1/monocytechemotacticandactivatingfactor,MCP-1/MCAFELISAkit 96T/48T
氧化鎳質(zhì)量規(guī)格:>99%,ARNickel(II) oxide green RatEndocrineglandvascularendothelialgrowthfactor,EG-VEGFELISA試劑盒大鼠腺來源的血管內(nèi)皮生長因子(EG-VEGF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 大鼠催乳素(PRL)試劑盒 Rat prolactin,PRL ELISA Kit
吩嗪質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRPhenazine 小鼠白細(xì)胞介素16(IL-16)ELISA試劑盒 ,英文名: IL-16 ELISA Kit CLIAKitforACP-5b(Mousetarate-resistaacidphosphatase5b)ELISAKit小鼠抗酸酸性1酸酶5b規(guī)格:48T/96T
檸檬酸三鉀一水質(zhì)量規(guī)格:>99%,BRPotassium tribasic, monohydrate 雞分泌型球蛋白A(SIgA)ELISA檢測試劑盒ChickensecretoryimmunoglobulinA,SIgAELISAKit 96T/48T 羥基吲哚氧甲基轉(zhuǎn)移酶(hydroxyindole-O-methylansferase)活性比色法定量檢測試劑盒20
L-焦谷氨酸;氧脯氨酸質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRH-Pyr-OH 人16α羥基雌酮1(16-α OHE-1)試劑盒 Human 16-αHydroxyesogen 1,16-α OHE-1 ELISA Kit ELISAKitPA-IgG/M/A人抗血小板抗體IgG/M/A規(guī)格:48T/96T
水質(zhì)鎳標(biāo)樣(濃度范圍:0.959-1.01(mg/L),分析標(biāo)準(zhǔn)品)Nickel standard質(zhì)量規(guī)格:濃度范圍:0.959-1.01(mg/L),分析標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠線粒體肌酸激酶1A(CKMT1A)ELISA試劑盒 ,英文名: CKMT1A ELISA Kit ELISAKitMPO小鼠髓過氧化物酶規(guī)格:48T/96T
芪偶氮Stilbazo質(zhì)量規(guī)格:鋁和其他金屬等用分光光度試劑 兔子視黃醇結(jié)合蛋白4(RBP-4)ELISA檢測試劑盒Rabbietinolbindingprotein4,RBP-4ELISAKit 96T/48T Humanbasicfibroblastgrowthfactor,bFGFELISAKit人堿性成纖維細(xì)胞生長因子(bFGF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
熒光鎵試劑(>98.0%(T))Lumogallion 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(T) 牛印度刺猬因子(IHH)試劑盒 Bovine Idian Hedgehog,IHH ELISA kit 人球蛋白樣轉(zhuǎn)錄體受體(ILTsR/LIR/CD85)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
浴酮靈二磺酸二鈉鹽Di Bathocuproinedisulfonate質(zhì)量規(guī)格:用于血液中銅的測定 英文名稱HumanEndothelialniicoxidesyhaseELISAKit人內(nèi)皮型合成酶(eNOS)規(guī)格:96T/48T 小鼠髓樣細(xì)胞觸發(fā)性受體2(EM2)試劑盒 Mouse iggering receptor expressed on myeloid cells 2,EM2 ELISA kit
亞洲柑桔黃龍病菌PCR試劑盒穩(wěn)定表達(dá)EBNA1的人胚腎細(xì)胞;293E(±)-柚皮素(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC>90%,標(biāo)準(zhǔn)品Naringenin
TMED4 Others Human 人 TMED4 / ERS25 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 二乙酰鳥嘌呤質(zhì)量規(guī)格:>95%N(2),9-Diacetylguanine
CL-0376LA795(小鼠肺腺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2山姜素(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品Alpinetin
Pcc4細(xì)胞,胚癌細(xì)胞 人白血病細(xì)胞,SK細(xì)胞 Asp2人胚胎腎細(xì)胞轉(zhuǎn)化細(xì)
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