目錄:上海帛科生物技術有限公司>>基因檢測PCR試劑盒>>RNA/DNA提取試劑盒>> 可逆型Taq DNA聚合酶抑制劑
注意事項:產(chǎn)品僅用于科研1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產(chǎn)物;9.PCR反應體系與反應條件。
產(chǎn)品名稱:可逆型Taq DNA聚合酶抑制劑
規(guī)格: 詳見說明
貨號:BK-P96708
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點:
本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設計引物而開發(fā)的高靈敏 PCR檢測試劑盒 。
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學分析,經(jīng)過TIANDZ及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除TIANDZ公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。
使用方法:
一、樣品采集:
1、食品樣品:樣品的采集與預培養(yǎng)按照樣品的采集與預培養(yǎng)按照菌檢驗要求進行。
2、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者靜脈血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品:取發(fā)病部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2. 標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(最好用帶芯槍頭,下同)。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
熒光定量PCR實驗步驟:
①取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混勻后,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。
Decyltrimetxylammoniumbromide(1-癸基)基溴化5克超,99% 小鼠α葡萄糖苷酶(α-glucosidase)ELISA試劑盒 ,英文名: α-glucosidase ELISA Kit
魚藤酮質(zhì)量規(guī)格:>90%,BRRotenone 英文名稱MouseCCL24ELISAKit小鼠CCL24規(guī)格:96T/48T 大鼠粘蛋白/粘液素5B(MUC5B)ELISA試劑盒 ,英文名: MUC5B ELISA Kit
7-表紫杉醇(標準品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品7-Epitaxol 冰凍切片組織衰老特異性晚期脂褐素鐵還原法(SCHMORL)染色試劑盒50 人抗核糖體P蛋白抗體(ARPA/Rib-P)ELISA檢測試劑盒Humanai-ribosomalPproteinaibody,ARPA/Rib-PELISAKit 96T/48T
澳洲茄胺;澳州茄胺(標準品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品Solasodine Ratepidermalgrowthfactorreceptor,EGFRELISA試劑盒大鼠表皮生長因子受體(EGFR)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 大鼠白介素7(IL-7)試劑盒 Rat Ierleukin-7,IL-7 ELISA kit
紫花前胡苷(標準品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品Nodakenin 小鼠白介素17(IL17)ELISA試劑盒 ,英文名: IL17 ELISA Kit CLIAKitfoGFBeta2ELISAKit大鼠轉(zhuǎn)化生長因子β2規(guī)格:48T/96T
頭孢拉定Cefradine質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 大量植物組織葉綠體DNA萃取試劑盒5(20克/) 豬鏈球菌通用型(SS-U)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
頭孢拉定(標準品)Cefradine質(zhì)量規(guī)格:>95%,標準品 RatKidneyinjurymolecule1,Kim-1ELISA試劑盒大鼠腎損傷分子1(Kim-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T Humanplacetallactogen,PLELISA試劑盒人胎盤泌乳素(PL)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
頭孢唑1,頭孢唑1酸Ceftizoxime acid質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR 小鼠胰島素受體β(ISR-β)ELISA試劑盒 ,英文名: ISR-β ELISA Kit ELISAKitPⅢNP豬Ⅲ型前膠原肽規(guī)格:48T/96T
頭孢唑1(標準品)Ceftizoxime acid質(zhì)量規(guī)格:>98%,標準品 小鼠抗胰蛋白酶(AT)ELISA檢測試劑盒MouseAi-ypsin,ATELISAKit 96T/48T HumanCytochromeP450c21/21-hydroxylase,CYP21BELISAKit人細胞色素P450c21B/21-羥化酶(CYP21B)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
可逆型Taq DNA聚合酶抑制劑