目錄:上海帛科生物技術有限公司>>生化檢測試劑盒>>輔酶Ⅰ系列>> NAD激酶（NADK）測試盒微量法
| 貨號 | BK-01S6323 |
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實驗結果判斷我有妙招：
1、定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
2、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2～3SD，作為陽性結果的閾值。
3、以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性，P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑，P／N小于1．5為陰性。
4、ELISA試劑盒目測定性法：加入底物經酶解和終止反應后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照，與陰性對照的顏色接近者，判定為陰性。
與您分享常用不穩定試劑的分類及要求：
① 易揮發、低燃點的試劑要密封，放于陰涼、通風、遠離火源處保存。
② 與水蒸氣，水發生反應的物質要密封，并遠離水源保存。
③ 易與氧氣作用的試劑，應將其固體或晶體密封保存，不宜長期存放其水溶液，亞硫酸，氫硫酸溶液要密封存放，鉀，鈉，白磷更要采用液封形式。
④ 與二氧化碳反應的物質要密封保存，其相應的溶液較固體更易反應，所以更要注意密封保存。
⑤ 易揮發或自身分解的試劑要密封，放于陰涼通風處保存。
本試劑盒僅供研究使用公司實驗室提供免費代測,7個工作日出結果,提供原始數據!
產品名稱 | 規格 | 檢測方法 | 貨號 |
NAD激酶（NADK）測試盒微量法 | 100管/48樣 | 微量法 | BK-01S6323 |
商品介紹：
測定意義 測定意義: NADK（EC 2.7.1.23）廣泛存在于動物、植物、微生物和培養細胞中，是目前所發現的生物體內惟一能夠催化NAD+磷酸化生成NADP+的酶，可催化NAD(H)以ATP或無機多聚磷酸[poly(P)]作為磷酰基供體進行磷酸化反應，生成NADP(H)。因此，NAD激酶在合成NADP(H)以及調節NAD(H)與NADP(H)的平衡上具有重要作用。 測定原理： NADK催化NAD+磷酸化，生成NADP+；NADP+可被6-磷酸葡萄糖脫氫酶還原為NADPH；NADPH通過PMS的遞氫作用，還原氧化型噻唑藍（MTT），通過在600 nm下測定MTT的還原速度（吸光值的變化）可反映出NADK活性的大小。 需自備的儀器和用品： 可見分光光度計/酶標儀、恒溫水浴鍋、臺式離心機、可調式移液器、微量石英比色皿/96孔板和蒸餾水。 |
試劑組成和配制:
提取液：液體 100 mL×1 瓶，4℃保存。
試劑一：液體 5 mL×1 瓶，4℃避光保存。
試劑二：液體 15 mL×1 瓶，4℃保存。
試劑三：液體 3 mL×1 瓶，4℃保存。
試劑四：液體 3 mL×1 瓶，4℃保存。
操作步驟：
1. 樣品的準備：
a. 細胞樣品的準備：收集細胞，用4 ℃或冰浴預冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預冷組織細胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心，取上清作為待測樣品。
b. 組織樣品的準備：動物用生理鹽水(0.9% NaCl ，含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細胞裂解液比例， 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心，取上清作為待測樣品。
d. 使用BCA蛋白濃度測定試劑盒（P1511）測定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個活力單位左右(不同細胞和組織的差異會比較大，該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準備20-100 ug蛋白量通常已經足夠用于后續檢測。
e. 根據蛋白濃度和預計的蛋白使用量，用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液適當稀釋樣品。例如，小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準備好的樣品如果當天測定，可以冰浴保存；如果當天不能完成測定，可以-70 ℃凍存，但建議盡量當天完成測定。
2. 試劑盒的準備工作：
a. WST-8酶工作液的配制： 參照下表，根據待檢測樣品(包括標準品) 數量，配制適量WST-8酶工作液，配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存，可當天使用，但建議盡量現配現用。
注意：由于酶溶液的用量較少且易沉降，必須注意在使用前先輕輕離心一下，然后適當混勻后再使用。
b. 反應啟動工作液配制：將試劑盒提供的反應啟動液 (40X) 溶解后混勻，按1μl 反應啟動液(40X) 加入39μl SOD 檢測緩沖液的比例進行稀釋，即為反應啟動工作液。4℃或冰浴保存，可當天使用，但建議盡量現配現用。
c. (可選做) SOD 標準品準備：需自備SOD標準品，用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標準品稀釋至如下系列濃度：20U/ml，10U/ml ，5U/ml，2.5U/ml，1.25U/ml，0.625U/ml。在隨后的檢測中可以各取20微升，參考樣品進行檢測。說明：為避免稀釋后SOD酶活性的下降， SOD標準品宜現稀釋現使用；本試劑盒對于SOD的檢測并不需要SOD作為標準品，但可以使用SOD標準品作為陽性對照或作為對SOD活性定量的參考。
100mL 非凍型組織RNA保存液 RNALOCKER 常溫
200 mL 小鼠內皮細胞分離液1.071 Cell Separation Solution -20℃保存
250mL HEPES Buffer,1M,pH7.6 HEPES Buffer,1M,pH7.6 常溫保存
2mL dATP溶液，2.5mM dATP Solution -20℃保存
2 ug pLentilox 3.7 pLentilox 3.7 低溫運輸，-20℃保存
沙氏葡萄糖瓊脂 Sabouraud’s Glucose Agar 250g
1瓶 MPC-11細胞株 MPC-11 低溫運輸和保存
心浸液瓊脂 Heart Infusion Agar 250g
5g 四氧 Alloxan Momohydrate 4℃保存
100mL Tricine Buffer,0.5M pH7.4 Tricine Buffer,0.5M pH7.4 常溫保存
50次 DNA電泳分子量標準（200-1500bp） DNAMETER 4℃保存
NAD激酶（NADK）測試盒微量法phospho-NDEL1(Ser242) 磷酸化中心粒蛋白Nudel抗體 規格: 0.1mlC3a Receptor/C3aR 過敏毒素C3受體/補體C3受體抗體 0.2ml
Rabbit Anti-human sIgA/HRP 辣根過氧化物標記兔抗人IgA 規格: 0.1mlTIF1 Alpha/TRIM24 轉錄中介因子Tif1α抗體 規格: 0.2ml
TRAF4/CART 1 瘤壞死因子受體相關蛋白4抗體 規格: 0.1mlCEP55 中心體蛋白55kDa抗體 規格: 0.2ml
ANKRD26 錨蛋白重復結構域蛋白26抗體 規格: 0.2mlPLC β2/Phospholipase C beta 2 磷酯Cβ2抗體 規格: 0.2ml
phospho-c-Abl(Tyr283) 磷酸化非受體酪激c-Abl抗體 0.1mlRabbit Anti-rat IgG/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標記的兔抗大鼠IgG 規格: 0.1ml
phospho-CBL2(Tyr731) 磷酸化原蛋白CBL2抗體 規格: 0.1mlKIF3A 驅動蛋白家族蛋白3抗體 規格: 0.2ml
COX4/COX IV-1 氧化IV亞型1抗體 規格: 0.2mlRNF25 環指蛋白25抗體 規格: 0.2ml
γ-taxilin/LSR5 脂多糖相關反應蛋白5抗體 0.2mlIFRD1 干擾素相關發育調節蛋白1抗體（神經生因子誘導蛋白PC4） 規格: 0.2ml
Goat Anti-rat IgG/PE-Cy3 PE-Cy3標記的羊抗大鼠IgG 規格: 0.1mlphospho-FADD(Ser194) 磷酸化Fas死亡結構域相關蛋白抗體 規格: 0.1ml
SPON2/M spondin/Mindin 細胞外基質底物反應蛋白2抗體 規格: 0.2mlPARL 骨骼肌細胞線粒體膜蛋白PARL抗體 規格: 0.2ml
UFC1 泛素結合UFC1抗體 規格: 0.2mlPDGFRL 小板源性生因子受體β樣蛋白抗體 規格: 0.2ml
Mesothelioma 間質細胞蛋白抗體 規格: 0.2mlSAMD15/C14orf174 14號染色體開放閱讀框174 規格: 0.2ml
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