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產品名稱 | 總三磷酸腺苷水解酶T-ATPase活性測定試劑盒 |
檢測方法 | 詳見說明 |
規格 | 詳見說明 |
貨號 | BK-S65253 |
儀器:
1、分光光度計/酶標儀/半自動生化分析儀(比色測定波長為550nm)
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 (孵育溫度為37℃)
3、臺式離心機
4、漩渦混勻器
5、微量移液器
樣本收集與前處理:
血清(漿)可直接測定。
紅細胞:需按照試劑盒中說明書上紅細胞的測定方法進行提取后測定。
動物組織樣本:可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液,離心取上清測定。
培養細胞、細菌、植物組織:常用PBS作為勻漿介質破碎后離心取上清測定。
具體的樣本前處理:參考我們隨貨發送的《實驗方法學》以及試劑盒中詳細說明書。
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測定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時不能產生氣泡
2.加溫
1.加標本后和加結合物后,應立即放入按規定的反應溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應疊在一起。
3.為避免蒸發,板上應加蓋,或將板平放在底部墊有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實驗臺上,以便 不時觀察,待對照管顯色適當時,即可終止酶反應。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟,但卻 是決定實驗成敗的關鍵。
2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結合的物質以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺,在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標儀測定結果,準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質 量和軟件的算法。
優點如下:
1、快速簡便:全程約50分鐘,可測100例左右樣本。
2、取樣量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可測紅細胞中的SOD,只需2ml靜脈血可測白細胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD,0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高:IC50=0.05g/ml,是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩定性好:試劑盒2~8℃存放6個月有效。
5、再現性好:變異系數CV=1.7%。
6、回收試驗: X =103.3%。
7、受外界影響因素小:干擾因素少,重復性強。
8、測試面廣:可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養細胞、細菌、植物組織、各種水產以及化妝品、保健品等,效果均佳。
人結直腸腺癌細胞;HCT 116 [HCT116]二錄化銅,英文名或英文縮寫:Copric chloride dihydrate,級別:CP,98.5%,規格:1克
人成纖維母細胞-胎兒(HDF-f)( 5×105 )溴化鱗(III) tribromidq 7789-60-8
RN-s, 大鼠紋狀體神經元錄雷他定 Lorctcdinq; 79794-72-2
人T瘤細胞Jurkat亞系;Jurkat77 大鼠腎成纖維細胞*培養基 100mLCASPASE-3INHIBITORVIICASPASE-3 抑制劑 VII5MGCLD PL-COLD
P815 小鼠肥大細胞癌細胞N-芴甲氧羰酰基-D-蛋酸(甲)NA
人膀胱癌細胞;5637(HTB-9)四本基硼酸鈉,英文名或英文縮寫:NaTBP,級別:CP,95%,規格:1毫升
SPP1 Others Human 人 OPN / SPP1 人細胞裂解液 (陽性對照) 豬膽鹽 Bilq sclt,pig 8008-63-7
SV40轉化的非洲綠猴腎細胞;COS-11-十六醇,英文名或英文縮寫:1-Hexadecanol,級別:AR,99%,規格:100克
SIGLEC6 Others Human 人 SIGLEC6 / CD327 人細胞裂解液 (陽性對照) L-賴酸乙酯100克
外周血白細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)Peptone 500g原裝 OXOID
F7 Others Human 人 F7 / Coagulation Factor VII 人細胞裂解液 (陽性對照) 肉豆蔻(標準品)Myristicin質量規格:HPLC≥95%,標準品
NIH3T3 小鼠胚胎成纖維細胞卡枯醇Kakuol質量規格:HPLC≥98%,標準品
猴脈絡膜-視網膜(內皮)細胞;RF/6AL-細辛脂素(標準品)L-Asarinin質量規格:HPLC≥98%,標準品
HNE2, 人鼻咽癌細胞系吉托皂苷元(標準品)Gitogenin質量規格:HPLC≥98%,標準品
人Butt瘤細胞;RAJI 大鼠氣管和支氣管上皮細胞*培養基 100mL異甘草素Isoliquiritigenin質量規格:≥98%,甘草提取
總三磷酸腺苷水解酶T-ATPase活性測定試劑盒SPP1 Others Human 人 OPN / SPP1 人細胞裂解液 (陽性對照) 1酸氫銨鈉(>98%,BR)質量規格:>98%,BRAmmonium phosphate
SV40轉化的非洲綠猴腎細胞;COS-1丁二酸銨(>98%,BR)質量規格:>98%,BRAmmonium succinate
SIGLEC6 Others Human 人 SIGLEC6 / CD327 人細胞裂解液 (陽性對照) 芍藥苷(98%)質量規格:>98%,高含量易分解Paeoniflorin
外周血白細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)5-羥基色氨酸,5-HTP質量規格:≥98.0%,BR,L構型5-Hydroxytryptophan
ERA-2細胞,人惡性多發性畸胎瘤細胞 人癌阿霉素耐藥細胞株,MCF/Adr細胞 臺盼藍TB5-羥基色氨酸(標準品)質量規格:≥98.0%,標準品,L構型5-HTP
實驗通用規則:
1、洗液不夠時,可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。
2、液體全部加完后,可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動30秒,混勻液體。也可以用酶標儀的晃動功能。
3、底物有一定的毒性,終止液對皮膚有腐蝕性,應盡量避免接觸。
4、檢測前,要打開酶標儀,使之穩定10分鐘以上。
5、吸取液體時,要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
6、將液體加到酶標孔中時,避免槍頭和孔內液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會自然流下去。
7、溫浴時,要用不干膠或膠帶紙封好酶標板,防止水分的蒸發。
8、洗板時,每次洗液加入后,應靜置1分鐘,使清洗更加*。沒有洗板機時,倒去液體后,要將酶標板在報紙或毛紙上用力拍干。
9、用槍吸取液體時速度不能太快,以免產生氣泡而使吸取量不準確。
10、底物是光敏感的,要在臨用前現配。