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目錄:上海帛科生物技術有限公司>>生化檢測試劑盒>>其它系列>> 超氧化物歧化酶(SOD)測試盒(NBT法)微量法

超氧化物歧化酶(SOD)測試盒(NBT法)微量法
  • 超氧化物歧化酶(SOD)測試盒(NBT法)微量法
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具體成交價以合同協議為準
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更新時間:2023-12-29 09:06:26瀏覽次數:803評價

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貨號 BK-01S6399
超氧化物歧化酶(SOD)測試盒(NBT法)微量法公司正在出售的產品:TTC營養瓊脂 英文名稱:TTC Nutrient Agar 產品規格:250g 營養肉湯(NB) 英文名稱:Nutrient Broth 產品規格:250g 營養瓊脂(NA) 英文名稱:Nutrient Agar 產品規格:250g 2216E瓊脂 英文名稱:2216E Agar 產品規格:250g

實驗結果判斷我有妙招:

1、定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。

2、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。

3、以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。

4、ELISA試劑盒目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照,與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。

與您分享常用不穩定試劑的分類及要求:

① 易揮發、低燃點的試劑要密封,放于陰涼、通風、遠離火源處保存。

② 與水蒸氣,水發生反應的物質要密封,并遠離水源保存。

③ 易與氧氣作用的試劑,應將其固體或晶體密封保存,不宜長期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。

④ 與二氧化碳反應的物質要密封保存,其相應的溶液較固體更易反應,所以更要注意密封保存。

⑤ 易揮發或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風處保存。

本試劑盒僅供研究使用公司實驗室提供免費代測,7個工作日出結果,提供原始數據!

產品名稱

規格

檢測方法

貨號

超氧化物歧化酶(SOD)測試盒(NBT法)微量法

100管/96樣

微量法

BK-01S6399

商品介紹:

測定意義:

SODEC 1.15.1.1)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養細胞中,催化超氧化物陰離子發生岐化作用,生成H2O2O2SOD不僅是超氧化物陰離子清除酶,也是H2O2主要生成酶,在生物抗氧化系統中具有重要作用。

測定原理:

通過及氧化酶反應系統產生超氧陰離子(O2-.)O2-.可還原氮藍四唑生成藍色甲臜,后者在560nm處有吸收;SOD可清除O2-.,從而抑制了甲臜的形成;反應液藍色越深,說明SOD活性愈低,反之活性越高。

需自備的儀器和用品:

可見分光光度計/酶標儀、臺式離心機、可調式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。

試劑組成和配制:

提取液:液體 100 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑一:液體 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。

試劑二:液體 15 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑三:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑四:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
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操作步驟:

1. 樣品的準備:

a. 細胞樣品的準備:收集細胞,用4 ℃或冰浴預冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預冷組織細胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心,取上清作為待測樣品。

b. 組織樣品的準備:動物用生理鹽水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心,取上清作為待測樣品。

d. 使用BCA蛋白濃度測定試劑盒(P1511)測定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個活力單位左右(不同細胞和組織的差異會比較大,該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準備20-100 ug蛋白量通常已經足夠用于后續檢測。

e. 根據蛋白濃度和預計的蛋白使用量,用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液適當稀釋樣品。例如,小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準備好的樣品如果當天測定,可以冰浴保存;如果當天不能完成測定,可以-70 ℃凍存,但建議盡量當天完成測定。

2. 試劑盒的準備工作:

a. WST-8酶工作液的配制: 參照下表,根據待檢測樣品(包括標準品) 數量,配制適量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現配現用。

注意:由于酶溶液的用量較少且易沉降,必須注意在使用前先輕輕離心一下,然后適當混勻后再使用。

b. 反應啟動工作液配制:將試劑盒提供的反應啟動液 (40X) 溶解后混勻,按1μl 反應啟動液(40X) 加入39μl SOD 檢測緩沖液的比例進行稀釋,即為反應啟動工作液。4℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現配現用。

c. (可選做) SOD 標準品準備:需自備SOD標準品,用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標準品稀釋至如下系列濃度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在隨后的檢測中可以各取20微升,參考樣品進行檢測。說明:為避免稀釋后SOD酶活性的下降, SOD標準品宜現稀釋現使用;本試劑盒對于SOD的檢測并不需要SOD作為標準品,但可以使用SOD標準品作為陽性對照或作為對SOD活性定量的參考。

50T 破傷風桿菌PCR檢測試劑盒  低溫運輸,-20℃保存

10 mg DiO(細胞膜綠色熒光探針) Fluorescent Probe and Tracer -20℃保存

250mL Borate Buffer(硼酸鹽緩沖液),0.5M,pH9.0  Borate Buffer,0.5M,pH9.0  常溫保存

1次 96孔板PCR片段純化回收試劑盒(離心法) 96 Microwell Plate PCR Clean-Up Kit 常溫

2 ug pGL5luci pGL5luci 低溫運輸,-20℃保存

麥康凱肉湯 MaConkey Broth 250g

1瓶 HeLa 229細胞株 HeLa 229 低溫運輸和保存

改良月桂基硫酸鹽胰蛋白胨肉湯-萬 Modified Lauryl Sulfate Tryptose Broth- VancoMycin 10ml*20支/包

10000U 核糖核酸RNase If RNase If  -20℃保存

100mL RNase-Free Sodium Acetate Solution(無RNase的乙酸鈉溶液),1M,pH4.5  RNase-Free Sodium Acetate Solution,1M,pH4.5  常溫保存

1 管 EHA103農桿菌 EHA103 Agrobacterium Strain -80℃保存

超氧化物歧化酶(SOD)測試盒(NBT法)微量法ADAM17/CD156b  瘤壞死因子α轉換 0.1ml

Goat Anti-rat IgG/PE-Cy5.5  PE-Cy5.5標記的羊抗大鼠IgG 規格: 0.1ml

DENND2D  MAP激激活死亡域蛋白2D抗體 規格: 0.2ml

MAGEG1/HCA4/NDNL2  黑色素瘤相關抗原G1抗體(肝相關蛋白4) 規格: 0.2ml

HIF 2α  缺氧誘導因子2α 抗體HIF-2α 規格: 0.1ml

Cullin 1  Cullin1抗體 規格: 0.1ml

phospho-c-Abl(Tyr204)  磷酸化非受體酪激c-Abl抗體 0.1ml

IFI78/MX1  干擾素誘導蛋白P78抗體 規格: 0.1ml

SLK/Fyn  酪蛋白激Fyn(同步原基因)抗體 規格: 0.2ml

CASPR/Neurexin4  軸突蛋白4/少突膠質細胞抗體 規格: 0.2ml

Goat Anti-Mouse IgM/APC  APC標記的羊抗小鼠IgM 規格: 0.1ml

PTN/Pleiotrophin  多效生因子抗體 規格: 0.1ml

 


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