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目錄:上海帛科生物技術(shù)有限公司>>生化檢測試劑盒>>氮代謝系列>> 土壤硝態(tài)氮測試盒微量法

土壤硝態(tài)氮測試盒微量法
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參考價(jià) 面議
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
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更新時(shí)間:2023-12-28 07:13:48瀏覽次數(shù):607評價(jià)

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貨號 BK-01S6501
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本試劑盒僅供研究使用公司實(shí)驗(yàn)室提供免費(fèi)代測,7個(gè)工作日出結(jié)果,提供原始數(shù)據(jù)!

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

檢測方法

貨號

土壤硝態(tài)氮測試盒微量法

100管/96樣

微量法

BK-01S6501

商品介紹:

測定意義:

土壤中的銨態(tài)氮可被土壤膠體吸附,呈交換性銨狀態(tài)氮肥,也可溶解在土壤溶液中,能直接被植物吸收利用,屬于速效性氮素。

測定原理

土壤中的銨態(tài)氮在強(qiáng)堿性介質(zhì)中與次氯酸鹽和作用,生成水溶性染料靛酚藍(lán),在625nm處有特征吸收峰,吸光值與銨態(tài)氮含量成正比。

自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器

天平、常溫離心機(jī)、可見分光光度計(jì)、微量石英比色皿,振蕩儀。

試劑組成和配制:

提取液:液體 100 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑一:液體 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。

試劑二:液體 15 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑三:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑四:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
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實(shí)驗(yàn)結(jié)果判斷我有妙招:

1、定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測物的含量。

2、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。

3、以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。

4、ELISA試劑盒目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照,與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。

與您分享常用不穩(wěn)定試劑的分類及要求:

① 易揮發(fā)、低燃點(diǎn)的試劑要密封,放于陰涼、通風(fēng)、遠(yuǎn)離火源處保存。

② 與水蒸氣,水發(fā)生反應(yīng)的物質(zhì)要密封,并遠(yuǎn)離水源保存。

③ 易與氧氣作用的試劑,應(yīng)將其固體或晶體密封保存,不宜長期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。

④ 與二氧化碳反應(yīng)的物質(zhì)要密封保存,其相應(yīng)的溶液較固體更易反應(yīng),所以更要注意密封保存。

⑤ 易揮發(fā)或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風(fēng)處保存。

 

操作步驟:

1. 樣品的準(zhǔn)備:

a. 細(xì)胞樣品的準(zhǔn)備:收集細(xì)胞,用4 ℃或冰浴預(yù)冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預(yù)冷組織細(xì)胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動(dòng)勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心,取上清作為待測樣品。

b. 組織樣品的準(zhǔn)備:動(dòng)物用生理鹽水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細(xì)胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動(dòng)勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心,取上清作為待測樣品。

d. 使用BCA蛋白濃度測定試劑盒(P1511)測定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細(xì)胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個(gè)活力單位左右(不同細(xì)胞和組織的差異會(huì)比較大,該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準(zhǔn)備20-100 ug蛋白量通常已經(jīng)足夠用于后續(xù)檢測。

e. 根據(jù)蛋白濃度和預(yù)計(jì)的蛋白使用量,用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液適當(dāng)稀釋樣品。例如,小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準(zhǔn)備好的樣品如果當(dāng)天測定,可以冰浴保存;如果當(dāng)天不能完成測定,可以-70 ℃凍存,但建議盡量當(dāng)天完成測定。

2. 試劑盒的準(zhǔn)備工作:

a. WST-8酶工作液的配制: 參照下表,根據(jù)待檢測樣品(包括標(biāo)準(zhǔn)品) 數(shù)量,配制適量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可當(dāng)天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。

注意:由于酶溶液的用量較少且易沉降,必須注意在使用前先輕輕離心一下,然后適當(dāng)混勻后再使用。

b. 反應(yīng)啟動(dòng)工作液配制:將試劑盒提供的反應(yīng)啟動(dòng)液 (40X) 溶解后混勻,按1μl 反應(yīng)啟動(dòng)液(40X) 加入39μl SOD 檢測緩沖液的比例進(jìn)行稀釋,即為反應(yīng)啟動(dòng)工作液。4℃或冰浴保存,可當(dāng)天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。

c. (可選做) SOD 標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)備:需自備SOD標(biāo)準(zhǔn)品,用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標(biāo)準(zhǔn)品稀釋至如下系列濃度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在隨后的檢測中可以各取20微升,參考樣品進(jìn)行檢測。說明:為避免稀釋后SOD酶活性的下降, SOD標(biāo)準(zhǔn)品宜現(xiàn)稀釋現(xiàn)使用;本試劑盒對于SOD的檢測并不需要SOD作為標(biāo)準(zhǔn)品,但可以使用SOD標(biāo)準(zhǔn)品作為陽性對照或作為對SOD活性定量的參考。

250mL TAE電泳液,50× TAE Buffer, 50× 常溫

2 ug pGAPZα C pGAPZα C 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

抑菌劑效力檢查培養(yǎng)基  

1瓶 CNE-2Z細(xì)胞株 CNE-2Z 低溫運(yùn)輸和保存

醇麥康凱瓊脂(SMAC)平板(9cm) Sorbitol Maconkey Agar Base 10個(gè)/包

100mg DNase I干粉 DNase I Powder 4℃或-20℃保存

100mL PIPES Buffer,0.5M, pH6.0  PIPES Buffer,0.5M, pH6.0  常溫保存

10塊 LB平板培養(yǎng)基(LB-Tet平板) LB Petri Dish 低溫

2 ug pPIC 6B pPIC 6B 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

葡萄糖酸鹽-雙岐桿菌鑒定  20支

2 ug pBNID  pBNID  低溫運(yùn)輸,-20℃保存

土壤硝態(tài)氮測試盒微量法CYP3A4  細(xì)胞色素P450 3A4抗體 規(guī)格: 0.1ml

Rabbit Anti-horse IgG/Cy5  Cy5標(biāo)記的兔抗馬IgG 規(guī)格: 0.1ml

phospho-FOXO4 (Ser262)  磷酸化叉蛋白4抗體 規(guī)格: 0.1ml

PTPIP51/FAM82A2  蛋白酪磷酸相互作用蛋白51抗體 規(guī)格: 0.2ml

phospho-P53(Ser9)  磷酸化瘤抑制基因P53抗體 規(guī)格: 0.1ml

BCL2L12  BCL2樣12含脯蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

DSPP/Dentin phosphophoryn  牙本質(zhì)磷蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml

UBE2D3  泛素蛋白連接D3抗體 規(guī)格: 0.2ml

Phospho-CRMP2 (Thr514)  磷酸化二嘧啶樣2抗體 規(guī)格: 0.1ml

phospho-ASK1(Ser1033)  磷酸化細(xì)胞凋亡信號調(diào)節(jié)激1抗體 規(guī)格: 0.1mlENO3  骨骼肌烯醇化抗體 規(guī)格: 0.2ml

GNAI3  抑制型G蛋白α3抗體 規(guī)格: 0.2mlMPZL2/EVA1  髓鞘蛋白P0樣蛋白2抗體 規(guī)格: 0.2ml

phospho-PRKD1(Ser738)  磷酸化蛋白激C mu型抗體 規(guī)格: 0.1mlCSMD3  CSMD3蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

 


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