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目錄:上海帛科生物技術有限公司>>生化檢測試劑盒>>乙醛酸循環系列>> 蘋果酸合酶(MS)測試盒可見分光光度法

蘋果酸合酶(MS)測試盒可見分光光度法
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具體成交價以合同協議為準
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更新時間:2023-12-27 09:06:14瀏覽次數:1017評價

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貨號 BK-01S6600
蘋果酸合酶(MS)測試盒可見分光光度法公司正在出售的產品:硝酸鹽肉湯(還原)(軍團菌) 英文名稱: 產品規格:20支/盒 馬尿酸鈉(軍團菌) 英文名稱: 產品規格:20支/盒 尿素生化管(軍團菌) 英文名稱: 產品規格:20支 明膠液化生化管(軍團菌) 英文名稱: 產品規格:20支/盒

注意事項:

1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時在冰上放置。

2、對照管只需要做一管。

3、若對照管吸光值大于2,建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用(10μl試劑二原液+60μl蒸餾水)。

4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管,對照管數值在什么范圍?

對照管的范圍是0.8-2。對照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現配現用;(2)沒有按順序加試劑;(3)反應時間不夠,可以延長反應時間(反應時間30min可以延長到40min)。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應倍數。

若出現測定管大于對照管,可能是樣本中雜質的影響太大,為了降低雜質的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測,通常可以使測定正常。計算公式中乘以相應稀釋倍數。

特別提醒:本產品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。

產品名稱:蘋果酸合酶(MS)測試盒可見分光光度法

產品規格:50管/48樣

檢測方法:可見分光光度法

產品貨號:BK-01S6600

產品分類:乙醛酸循環系列
商品介紹:

測定意義:

蘋果酸合酶(MSEC 4.1.3.2)是屬于轉移酶中酰基轉移酶的一類,主要存在于植物和微生物中。MS是乙醛酸循環的關鍵酶之一,在MS催化下乙醛酸與乙酰反應生成蘋果酸。

測定原理:

MS催化乙酰CoA和乙醛酸產生蘋果酸,同時生成,使無色的DTNB轉變成黃色的TNB,在 412nm處有特征吸光值。

需自備的儀器和用品:

酶標儀、臺式離心機、水浴鍋、可調式移液器、96孔板、研缽、冰、和蒸餾水

所需的儀器和用品:

可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機、移液器、研缽、冰和蒸餾水

四、超氧化物歧化酶(SOD)的測定:

建議正式實驗前選取 2 個樣本做預測定,了解本批樣品情況,熟悉實驗流程,避免實驗

樣本和試劑浪費!

1、樣本制備

組織樣本:

取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進行

勻漿(或使用各類常見勻漿器)4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測液。

【注】:若增加樣本量,可按照組織質量(g):提取液體積(mL)15~10 的比例進行提取

 

細菌/細胞樣本:

先收集細菌或細胞到離心管內,離心后棄上清;取約 500 萬細菌或細胞加入 1mL

提取液,超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復 30 次);

12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。

【注】:若增加樣本量,可按照細菌/細胞數量(10

4):提取液(mL)為 500~10001 的比例進行提取。 液體樣本:直接檢測;若渾濁,離心后取上清檢測。

QQ截圖20220307153537.png 

實驗方法學:

一、肝素的配制:

市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。

肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉動,每隔5~10分鐘轉動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。

二、血液樣本的收集:

全血根據收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。

1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。

2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。

選擇抗凝的注意點:

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后

用于測定。

麥康凱瓊脂(含結晶紫)  250g

1瓶 L1210細胞株 L1210 低溫運輸和保存

2216E液體培養基 2216E Liquid Medium 250g

500U 天冬轉氨 Aspartate Aminotransferase -20℃保存

500mL Sodium-free Lactated Buffered Ringer’s Solution Sodium-free Lactated Buffered Ringer’s Solution 常溫保存

100mL RIPA裂解液(強) RIPA Lysis Buffer(S) 4℃保存

500mL Potassium Phosphate Solution,0.2M, pH7.5   Potassium Phosphate Solution,0.2M, pH7.5   常溫保存

50次 一站式磁珠法動物mRNAout One-Step MAG Animal mRNA Isolation Kit 4℃保存

2 ug pCMV-hyPBase pCMV-hyPBase 低溫運輸,-20℃保存

Campy-Cefex瓊脂基礎 Campy-Cefex Agar Base 250g

10mg 辣根過氧化物 Peroxidase Horseradish(POD) 4℃保存

蘋果酸合酶(MS)測試盒可見分光光度法P53(wt-p53)  瘤抑制基因抗體(野生型P53) 規格: 0.1ml

GAD65  谷脫羧-65抗體(C端) 規格: 0.1ml

CD133  造干細胞抗原CD133抗體 0.1ml

RBM26  RNA結合蛋白26抗體 規格: 0.2ml

Phospho-Syk (Tyr323)  磷酸化非受體型酪蛋白激抗體 規格: 0.1ml

CD33/Siglec-3  CD33抗體 規格: 0.1ml

Rabbit Anti-chicken IgG/Alexa Fluor 488  Alexa Fluor 488標記的兔抗雞IgG 規格: 0.1ml

AVPR2  加壓素受體2抗體 規格: 0.1ml

phospho-Bcl-xL/BCL2L1(Thr115)  磷酸化Bcl-xL蛋白抗體 規格: 0.1ml

Mouse Anti-Guinea pig IgG/Cy5.5  Cy5.5標記的小鼠抗豚鼠IgG 規格: 0.1ml

Phospho-SMC1 (Ser360)  磷酸化染色體結構維持蛋白質1抗體 規格: 0.1ml

HEXIM1/EDG1  雌激素下調基因1蛋白抗體 規格: 0.2ml 

 


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