目錄:上海帛科生物技術有限公司>>生化檢測試劑盒>>糖酵解系列>> 3磷酸甘油酸激酶(PGK)測試盒紫外分光光度法
| 貨號 | BK-01S6616 |
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實驗方法學：
一、肝素的配制：
市售肝素凍干粉140單位/mg，1克瓶裝，每瓶140，000單位，稱取0.1克肝素凍干粉，加生理鹽水5ml，配成2800單位/ml。取50～100μl濕潤管壁，可抗凝人血3～5ml，血液不會凝固。老鼠血易凝固，所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉，加3ml生理鹽水溶解后，取50～100μl,可抗凝鼠血2～4ml。
肝素抗凝管的制備：取0.1克肝素凍干粉，加2.5ml生理鹽水。取100μl～150μl滴入塑料或玻璃管中，濕潤管壁，低于80℃小烤箱中（可以用烤面包的小烤箱），橫向轉動，每隔5～10分鐘轉動一次，直至干燥后放入4℃保存，可使2～5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集：
全血根據收集的條件，分成不抗凝和抗凝兩種。同時，不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清；抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1～2小時，直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血，輕輕顛倒充分抗凝后，可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據不同抗凝劑的性能特征，選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。
選擇抗凝的注意點：
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致，同時所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒，充分抗凝，防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多（1ml抗凝全血能分離出0.4～0.5ml血漿）;
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后，解凍時可能會出現絮狀渾濁，如有則需要離心去掉渾濁后
用于測定。
特別提醒：本產品僅供科研研究使用，不得用于人體臨床直接檢測。
產品名稱：3磷酸甘油酸激酶(PGK)測試盒紫外分光光度法
產品規格：50管/48樣
檢測方法：紫外分光光度法
產品貨號：BK-01S6616
產品分類：糖酵解系列
商品介紹：
測定意義: 3-磷酸甘油酸激酶是糖酵解的關鍵酶，廣泛存在于動植物和微生物體內，催化1，3-二磷酸甘油酸轉變為3-磷酸甘油酸，產生1分子ATP，具有影響DNA復制和修補及刺激病毒RNA合成等生物學功能，廣泛應用于藥物靶標設計。 測定原理 3-磷酸甘油酸激酶催化3-磷酸甘油酸和ATP產生1,3-二磷酸甘油酸和ADP，1,3-二磷酸甘油酸在3-磷酸甘油醛脫氫酶和NADH作用下產生3-磷酸甘油醛、NAD和磷酸，340nm處的吸光度變化反映了3-磷酸甘油酸激酶的活性的高低。 自備實驗用品及儀器 天平、低溫離心機、研缽、紫外分光光度計、1 mL石英比色皿。 |
所需的儀器和用品：
可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿（光徑 1cm）、低溫離心機、移液器、研缽、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶（SOD）的測定：
建議正式實驗前選取 2 個樣本做預測定，了解本批樣品情況，熟悉實驗流程，避免實驗
樣本和試劑浪費！
1、樣本制備
① 組織樣本： 取約 0.1g 組織（水分充足的樣本可取 0.25g），加入 1mL 提取液，在 4oC 或冰浴進行 勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min，取上清作為待測液。 【注】：若增加樣本量，可按照組織質量（g）：提取液體積(mL)為 1：5~10 的比例進行提取
| ② 細菌/細胞樣本： 先收集細菌或細胞到離心管內，離心后棄上清；取約 500 萬細菌或細胞加入 1mL 提取液，超聲波破碎細菌或細胞（冰浴，功率 200W，超聲 3s，間隔 10s，重復 30 次）； 12000rpm 4℃離心 10min，取上清，置冰上待測。 【注】：若增加樣本量，可按照細菌/細胞數量（10 4）：提取液（mL）為 500~1000：1 的比例進行提取。 ③ 液體樣本：直接檢測；若渾濁，離心后取上清檢測。 |
注意事項：
1、試劑二為酶，不可冷凍，使用時在冰上放置。
2、對照管只需要做一管。
3、若對照管吸光值大于2，建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用（10μl試劑二原液+60μl蒸餾水）。
4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管，對照管數值在什么范圍？
對照管的范圍是0.8-2。對照管吸光值過低可能是（1）試劑二或試劑四沒有現配現用；（2)沒有按順序加試劑；（3）反應時間不夠，可以延長反應時間（反應時間30min可以延長到40min）。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應倍數。
若出現測定管大于對照管，可能是樣本中雜質的影響太大，為了降低雜質的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測，通常可以使測定正常。計算公式中乘以相應稀釋倍數。
改良馬丁培養基 Martin Broth,Modified 250g
1瓶 BV2細胞株 BV2 低溫運輸和保存
100mL RNase-free SDS溶液,10% 常溫
250U KOD DNA聚合 KOD DNA Polymerase -20℃保存
100mL PEG 3350 Solution,50% PEG 3350 Solution,50% 常溫保存
0.1mL×10 DH5α化學感受態細胞 DH5α Competent Cell -80℃保存
2 ug pNI_v2 pNI_v2 低溫運輸，-20℃保存
MS培養基（含瓊脂，不含蔗糖） 250g
1瓶 THLE-3細胞株 THLE-3 低溫運輸和保存
賴鐵瓊脂（LIA） Lysine Iron Agar 250g
1g 熒光增白劑 28 Fluorescent Brightener 28 室溫干燥保存
3磷酸甘油酸激酶(PGK)測試盒紫外分光光度法EphA2/Eph receptor A2 內皮細胞受體蛋白酪激抗體 規格: 0.1ml
Fetuin beta 胎球蛋白B抗體(Fetuin β) 規格: 0.2ml
PBEF1(CT) 內脂素/內臟脂肪素(C端抗體) 規格: 0.1ml
PDHA1/PDH-E1α 丙酮酸脫α1抗體 規格: 0.2ml
PRB2/p130 視網膜母細胞瘤相關蛋白p130抗體 規格: 0.1ml
PRKCQ/PKC theta 蛋白激C theta抗體 規格: 0.1ml
phospho-PRKCZ(Thr500) 磷酸化蛋白激C(T500)抗體 規格: 0.2ml
PRRSV-GP5 豬藍耳毒GP5蛋白抗體 規格: 1ml
Mouse Anti-Bov IgG/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標記的小鼠抗牛IgG 規格: 0.1ml
Phospho-Smad2(Thr220) 磷酸化細胞信號轉導分子SMAD2抗體 規格: 0.1ml
UBOX5/RNF37 泛素結合7相互作用蛋白5抗體 規格: 0.2ml
SLC26A4 鈉碘單獨轉運蛋白SLC26A4抗體 規格: 0.1ml
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