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目錄:上海帛科生物技術有限公司>>生化檢測試劑盒>>離子系列>> 血清總鐵結合能力測試盒微量法

血清總鐵結合能力測試盒微量法
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更新時間:2023-12-25 13:55:40瀏覽次數:1202評價

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貨號 BK-01S6797
血清總鐵結合能力測試盒微量法公司正在出售的產品:A1 進口、國產A1 Medium用于檢測水中的大腸菌群(US-EPA標準)250胰胨大豆胨固綠瓊脂進口、國產Tryptic Soy Fast Green Agar用于濾膜細菌總數的測定和分離培養(NEOGEN方法)250LES Endo 瓊脂進口、國產m-Endo Agar,LES用于濾膜細菌計數(Merck方法)250gm-TGE 肉湯進口、國產

本試劑盒僅供研究使用公司實驗室提供免費代測,7個工作日出結果,提供原始數據!

產品名稱

規格

檢測方法

貨號

血清總鐵結合能力測試盒微量法

100管/96樣

微量法

BK-01S6797

商品介紹:

測定意義:

血清總鐵結合能力指血清轉鐵蛋白可結合鐵的能力,其含量高低與缺鐵性貧血、急性肝炎等疾病的發生密切相關。

測定原理

Fe2+與菲洛嗪反應形成紫紅色化合物,在562nm處有特征吸收峰。堿性條件下,血清轉鐵蛋白可以與Fe3+結合,剩余未結合的Fe3+可以被還原成Fe2+,此時吸光度A1與未結合Fe3+數量正相關;酸化后,轉鐵蛋白結合的Fe3+釋放,并且進一步被還原成Fe2+ ,此時吸光度A2與總Fe3+數量正相關。A2A1TIBC濃度呈正比。

自備實驗用品及儀器

天平、可見分光光度計、微量石英比色皿、蒸餾水。

試劑組成和配制:

提取液:液體 100 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑一:液體 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。

試劑二:液體 15 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑三:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑四:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
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實驗結果判斷我有妙招:

1、定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。

2、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。

3、以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。

4、ELISA試劑盒目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照,與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。

與您分享常用不穩定試劑的分類及要求:

① 易揮發、低燃點的試劑要密封,放于陰涼、通風、遠離火源處保存。

② 與水蒸氣,水發生反應的物質要密封,并遠離水源保存。

③ 易與氧氣作用的試劑,應將其固體或晶體密封保存,不宜長期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。

④ 與二氧化碳反應的物質要密封保存,其相應的溶液較固體更易反應,所以更要注意密封保存。

⑤ 易揮發或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風處保存。

 

操作步驟:

1. 樣品的準備:

a. 細胞樣品的準備:收集細胞,用4 ℃或冰浴預冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預冷組織細胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心,取上清作為待測樣品。

b. 組織樣品的準備:動物用生理鹽水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心,取上清作為待測樣品。

d. 使用BCA蛋白濃度測定試劑盒(P1511)測定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個活力單位左右(不同細胞和組織的差異會比較大,該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準備20-100 ug蛋白量通常已經足夠用于后續檢測。

e. 根據蛋白濃度和預計的蛋白使用量,用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液適當稀釋樣品。例如,小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準備好的樣品如果當天測定,可以冰浴保存;如果當天不能完成測定,可以-70 ℃凍存,但建議盡量當天完成測定。

2. 試劑盒的準備工作:

a. WST-8酶工作液的配制: 參照下表,根據待檢測樣品(包括標準品) 數量,配制適量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現配現用。

注意:由于酶溶液的用量較少且易沉降,必須注意在使用前先輕輕離心一下,然后適當混勻后再使用。

b. 反應啟動工作液配制:將試劑盒提供的反應啟動液 (40X) 溶解后混勻,按1μl 反應啟動液(40X) 加入39μl SOD 檢測緩沖液的比例進行稀釋,即為反應啟動工作液。4℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現配現用。

c. (可選做) SOD 標準品準備:需自備SOD標準品,用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標準品稀釋至如下系列濃度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在隨后的檢測中可以各取20微升,參考樣品進行檢測。說明:為避免稀釋后SOD酶活性的下降, SOD標準品宜現稀釋現使用;本試劑盒對于SOD的檢測并不需要SOD作為標準品,但可以使用SOD標準品作為陽性對照或作為對SOD活性定量的參考。

2 ug pCEP4-CAT pCEP4-CAT 低溫運輸,-20℃保存

酪蛋白葡萄糖瓊脂 Sabouraud Dextrose Agar 250g

1g 對苯 -β-D- 吡喃半乳糖苷 p-Nitrophenyl-β-D-Galacto-Pyranoside(PNPG) -20℃保存

50T 病毒H5N1亞型PCR檢測試劑盒  低溫運輸,-20℃保存

1瓶 RPMI8826細胞株 RPMI8826 低溫運輸和保存

250mL BSA Blocking Buffer in TBS with Tween-20  BSA Blocking Buffer in TBS with Tween-20  常溫保存

100次 DNA PAGE膠回收試劑盒 PAGE DNABACK 4℃保存

2 ug pGL4.27/CRE pGL4.27/CRE 低溫運輸,-20℃保存

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1瓶 HUVEC細胞株 HUVEC 低溫運輸和保存

李氏菌增菌肉湯(LB2) Listeria Enrichment Broth Base 9ml*20支/包

血清總鐵結合能力測試盒微量法HLA B/HLA G  人類白細胞抗原G抗體 規格: 0.1ml

CK18  細胞角蛋白18抗體(C端) 規格: 0.1ml

Rabbit Anti-Bovine IgM/PE  PE標記的兔抗牛IgM 規格: 0.1ml

P-selectin/CD62p  P選擇素抗體 規格: 0.1ml

TRIM5α/RNF88  環指蛋白88抗體 規格: 0.2ml

KIF15  驅動蛋白家族成員15抗體 規格: 0.2ml

Phospho-Lyn (Tyr507)  膜相關蛋白酪激Lyn抗體 規格: 0.1ml

HLA DM  組織相容性復合體α抗體 規格: 0.2ml

SMC5  染色體結構維持蛋白5抗體 規格: 0.2ml

Phospho-TLK1(Ser695)  磷酸化調節染色體組裝激1抗體 規格: 0.1ml

IFI35  干擾素誘導35蛋白抗體 規格: 0.2ml

SLU7  SLU7蛋白抗體 規格: 0.2ml

 


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