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試劑配制：
1、酶聯(lián)板（Assay plate ）：一塊（96孔或者48孔）。
2、標(biāo)準(zhǔn)品（Standard）：2瓶（凍干品）。
3、樣品稀釋液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。
4、生物素標(biāo)記抗體稀釋液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。
6、生物素標(biāo)記抗體（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）
7、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）
8、底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。

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實驗標(biāo)準(zhǔn)品圖：
40 ng/L，5號標(biāo)準(zhǔn)品，150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
20 ng/L，4號標(biāo)準(zhǔn)品，150μl的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
10 ng/L，3號標(biāo)準(zhǔn)品，150μl的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
5 ng/L，2號標(biāo)準(zhǔn)品，150μl的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
2.5 ng/L，1號標(biāo)準(zhǔn)品，150μl的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
測定步驟：
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準(zhǔn)確
3.管底加樣，不能加在管壁上
4.加樣時不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴
1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后，應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。
3.為避免蒸發(fā)，板上應(yīng)加蓋，或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后，反應(yīng)的時間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。 如室溫高于20℃，ELISA板可避光放在實驗臺上，以便 不時觀察，待對照管顯色適當(dāng)時，即可終止酶反應(yīng)。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應(yīng)步驟，但卻 是決定實驗成敗的關(guān)鍵。
2.目的是洗去反應(yīng)液中沒有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺，在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標(biāo)儀測定結(jié)果，準(zhǔn)確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標(biāo)儀的質(zhì) 量和軟件的算法。

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地衣芽孢桿菌 Bacillus licheniformisEGFP標(biāo)簽蛋白裂解液

青霉菌 Penicillium sp．釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

人腸微血管內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基淡天藍(lán)鏈霉菌 Streptomyces coerulesscens

普通變形桿菌 Proteus vulgaris蟾毒靈

膠韌革菌 Gloeostereum incarnatum宇佐美曲霉變種 Aspergillus usamii var.

中性紅染色液側(cè)耳 Pleurotus sp.

大鼠甲狀腺上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基細(xì)胞周期與細(xì)胞凋亡檢測試劑盒

屎腸球菌 Enterococcus faeciumHBE, 正常人支氣管上皮細(xì)胞系

中慢生華癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuii煙曲霉 Aspergillus fumigatus

NCI-H23(人非小細(xì)胞肺細(xì)胞)大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum

桿菌屬 Lactobacillus sp.Lncap clone FGC(人前列腺細(xì)胞)

無花果曲霉 Aspergillus ficuum泡盛曲霉 Aspergillus awamori

靈芝 Ganoderma lucidium酸鏈球菌 Lactococcus lactis

褐球固氮菌 Azotobacter chrooccumHCT116, 人結(jié)直腸細(xì)胞

B16(小鼠黑色素瘤細(xì)胞)釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae