病毒滅活能力試驗(yàn)是一種十分重要的試驗(yàn)過程，做病毒的殺滅效果試驗(yàn)檢測(cè)，首先需要根據(jù)具體的產(chǎn)品具體的病毒滅活分析，病毒滅活效果驗(yàn)證，要找可靠具備CMA資質(zhì)認(rèn)證的病毒殺滅試驗(yàn)檢測(cè)中心機(jī)構(gòu)。--廣東省華微檢測(cè)股份有限公司。
病毒滅活能力試驗(yàn)的病毒懸液制備方法？
1、從液氮中取出冷凍的測(cè)試宿主細(xì)胞，在37°C的溫水中迅速融化，并使用毛細(xì)管吸管將其移植到細(xì)胞中含維護(hù)溶液的細(xì)胞管中，移液幾次以混合，立即離心（3000r/min，3min），并除去上清液。然后添加適當(dāng)?shù)募?xì)胞維持溶液，移液幾次以混合，然后如上所述離心后，轉(zhuǎn)移到含有10種培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中。每天觀察細(xì)胞生長(zhǎng)，并在單層細(xì)胞過度生長(zhǎng)時(shí)將其用于消毒測(cè)試。
2、取出冷凍保存的測(cè)試病毒種類，在37°C水浴中融化，用細(xì)胞維持液稀釋10倍，然后接種到已生長(zhǎng)有單層細(xì)胞的細(xì)胞瓶中，將其置于37°C的培養(yǎng)箱中，使其吸附并與細(xì)胞一起生長(zhǎng)。每天觀察病變，并在3/4個(gè)細(xì)胞病變時(shí)收獲病毒。
3、用聲波（或反復(fù)冷凍和融化）破壞含病毒的培養(yǎng)基中的宿主細(xì)胞，并在冰浴中破壞宿主細(xì)胞以釋放病毒。然后，盡快離心（6000r/min，15min）以除去沉淀物（主要是細(xì)胞碎片），上清液即為所需的病毒懸液。每管裝1.0份等分試樣到無菌離心管（1.5）中。
4、取病毒懸液，并根據(jù)病毒滴度確定方法確定病毒滴度。將其余的冷凍并儲(chǔ)存在-80℃下以備后用。
病毒滅活能力試驗(yàn)的三種原理：
1、包膜的破壞：包膜中含有脂質(zhì)，因此包膜的病毒可以被脂質(zhì)溶劑快速破壞，例如氯仿或脫氧膽酸鈉可以使它失活病毒。實(shí)際上，病毒對(duì)脂質(zhì)溶劑的敏感性可用于檢查病毒是否具有包膜。諸如滲透壓變化，凍結(jié)和解凍，熱量和干燥之類的物理因素可能會(huì)損壞外殼。一般認(rèn)為，呼吸道感染病毒對(duì)干燥的抵抗力較弱，并且傳播主要是直接的人感染，這是由于包膜引起的。
2、病毒蛋白質(zhì)變性：可使蛋白質(zhì)變性的化學(xué)試劑可以使病毒失活，例如酚，次氯酸鹽，酸和堿等。。加熱引起的變性也是一種有效的滅活方法。一般而言，該病毒對(duì)熱的抵抗力較弱，并且在60°C的幾分鐘內(nèi)，該病毒的傳染性顯著降低。因此，當(dāng)分離出病毒時(shí)，從患者身上采集的標(biāo)本需要在低溫下保存，并迅速送到實(shí)驗(yàn)室，并在-80下保存以進(jìn)行長(zhǎng)期保存。低于°C的低溫條件。
3、病毒核酸損傷：諸如y射線之類的電離輻射會(huì)切斷核酸，紫外線會(huì)導(dǎo)致核苷酸鏈上相鄰的嘧啶堿基形成二聚體，從而破壞病毒基因的功能。另外，染料如as啶橙或中性紅可以與病毒核酸結(jié)合，暴露于光下可以分解核酸并使滅活的漿果失活。
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