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鴨p質醇(Cortisol)ELISA試劑盒

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具體成交價以合同協議為準

產品型號

品牌ZCIBIO茁彩生物

廠商性質生產商

所在地上海

更新時間:2024-09-13 08:52:00瀏覽次數:170次

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鴨p質醇(Cortisol)ELISA試劑盒,采用酶連免疫法檢測樣本中的鴨p質醇(Cortisol)的濃度

中文名稱:鴨p質醇(Cortisol)ELISA試劑盒

檢測樣本:血清、血漿、細胞上清液、組織勻漿及相關生物液體

血清:不含抗凝劑的/含促凝劑。(通常為紅色、黃色、橘色管蓋的)

血漿:含抗凝劑。(通常為綠色、紫色管蓋的 )

樣品收集后若在1周內進行檢測可保存于2-8℃,若不能及時檢測,請按一次使用量分裝,凍存于-20℃(1個月內檢測),或-80℃(3個月內檢測),避免反復凍融。在檢測前,冷凍過的樣本應緩慢地融化并離心除去凍融過程產生的沉淀物。


細胞樣本裂解方案

貼壁細胞裂解方法

單層貼壁細胞總蛋白的提取:

1、倒掉培養液。

2、每瓶細胞加5ml 4℃預冷的PBS(0.01M pH7.2~7.3)。平放輕輕搖動1min洗滌細胞,然后棄去洗液。重復以上操作兩次,共洗細胞三次以洗去培養液。將PBS棄凈后把培養瓶置于冰上。

3、按1ml裂解液加10 μl PMSF(100mM),搖勻置于冰上。(PMSF要搖勻至無結晶時才可與裂解液混合。)

4、每瓶細胞加400 μ 含PMSF的裂解液,于冰上裂解30min,為使細胞充分裂解培養瓶要經常來回搖動。

5、裂解完后,用干凈的刮棒將細胞刮于培養瓶的一側(動作要快),然后用槍將細胞碎片和裂解液移至1.5ml離心管中。(整個操作盡量在冰上進行。)

6、于4℃下12000rpm離心5min。(提前開離心機預冷)

7、將離心后的上清分裝轉移倒0.5min的離心管中放于-20℃保存。


懸浮細胞裂解方法

1. 培養1×106-1×107個細胞;

2. 將細胞轉移到15ml圓形離心管,4?C, 500g離心5min;

3. 小心去除上清,加入5ml預冷PBS重懸細胞,4?C, 500g離心5min;

4. 盡可能多的去除上清,小心不要碰到細胞沉淀。

5. 在上步驟獲取的細胞中,加入200ul ProcartaPlex Cell Lysis Buffer。

6. 吹吸混勻8-10次,冰上孵育5min;

7. 將所有細胞轉移到1.5ml離心管;

8. 4?C, 14000g(離心機大轉速)離心10min;

9. 將上清轉移到新管中。該上清可立即用于檢測或者保存在-80?C。

10. 按照多因子檢測試劑盒操作方法檢測。樣本孔加入25ul細胞裂解液和25ul Universal Assay Buffer。


可選步驟:

  建議細胞裂解后上清進行蛋白定量檢測。我們推薦使用Lowry法蛋白定量檢測。建議將所有樣本使用預冷的ProcartaPlex Cell Lysis Buffer調整樣本蛋白濃度方為4-8 mg/ml。






















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